E3泛素连接酶RNF39通过促进DDX3降解负调IFN-β表达

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• 论文作者：王雯雯 ; 宋慧 ; 余仲夏 ; 李琪 ; 赵伟
• 年：2016
• 作者机构：山东大学;
• 论文关键词：RNF39 ; DDX3 ; IFN-β
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R392
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：1
• 文件大小：1328k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

背景:固有免疫是机体抗感染的第一道防线,在宿主清除入侵病毒的过程中发挥重要作用。固有免疫系统通过多种模式识别受体(pattern-recognition receptor,PRR)识别病毒复制过程中产生的病原体相关分子模式(pathogen associated molecular pattern,PAMP),通过一系列信号传导过程,激活Ⅰ型干扰素和促炎性细胞因子的表达。E3泛素连接酶RNF39基因位于人类第6号染色体上MHC-Ⅰ类分子编码区。已有研究表明,该染色体区域存在多个TRIM家族的分子,均可参与固有免疫反应的调控。因此,我们推测RNF39可能参与固有免疫反应调控。目的:探讨RNF39在固有免疫应答中的调控作用,并阐明其作用分子机制。方法:用LPS刺激、Se V或VSV病毒感染小鼠腹腔原代巨噬细胞,Western Blot检测RNF39的表达变化;RT-PCR检测RNF39在小鼠各组织、器官的表达情况;RNF39 non-smsiRNA转染小鼠腹腔巨噬细胞,LPS/poly(I:C)/VSV/Se V等刺激,ELISA检测IFN-β表达情况;在HEK293T细胞中,过表达RNF39质粒及DDX3/TBK1/IKK-ε/STING/TRAF3/IRF3等接头分子,Western Blot检测RNF39对这些接头分子表达的影响;免疫共沉淀检测RNF39与接头分子的结合情况。结果:RNF39在小鼠多个组织、器官中均有表达,且LPS刺激、及Se V/VSV感染均可诱导小鼠巨噬细胞中RNF39的表达;RNF39干扰可明显上调小鼠巨噬细胞中LPS/Se V/VSV诱导的IFN-β表达;RNF39干扰明显上调小鼠巨噬细胞中DDX3蛋白表达,而对其他接头分子表达无明显影响;LPS刺激以及Se V感染小鼠巨噬细胞后,可检测到内源性RNF39与DDX3结合,在HEK293细胞中过表达RNF39与DDX3的质粒,可检测到外源性RNF39与DDX3结合。结论:RNF39可特异性结合DDX3,促进其降解,进而抑制IFN-β表达。

引文