羊Peroxiredoxin 6生物活性及差异表达分析
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摘要
Peroxiredoxin 6(Prdx6)是一种双功能蛋白,同时具有过氧化物酶活性和磷脂酶A2活性。Prdx6可能参与到宿主抵抗病原微生物感染过程的免疫反应,同时病原体自身的Prdx6在减少机体对病原微生物的氧化伤害方面发挥着作用。近年来,研究发现Prdx6与多种疾病的发生发展相关。布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的世界范围内的人兽共患传染病。目前仍然没有关于布鲁氏菌病与Prdx6相互关联的报道。本课题组前期研究中,通过建立强、弱布鲁氏菌感染羊血液白细胞层细胞SSH文库,筛选得到差异表达基因,得到Prdx6基因部分c DNA序列,并扩增得到了Prdx6全长c DNA序列。本实验通过原核表达系统对Prdx6进行原核表达,成功纯化得到高纯度的Prdx6重组蛋白,并对Prdx6重组蛋白的抗氧化损伤活性进行了分析验证。利用Western-blot技术与实时荧光定量PCR技术对Prdx6的组织差异表达情况进行了分析。并且利用实时荧光定量检测方法对强、弱毒株布鲁氏菌感染羊血液白细胞中Prdx6含量的变化进行了分析。结果显示,Prdx6广泛分布于羊的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、瘤胃、肠、肌肉及血液白细胞中。当小尾寒羊接种布鲁氏菌强毒株后,血液白细胞中Prdx6的m RNA水平会上调,而接种布鲁氏菌弱毒株可以下调Prdx6的m RNA水平。
引文

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