盾壳霉产孢缺陷突变体的分析
详细信息 查看官网全文
- 论文作者：罗晨薇 ; 程家森 ; 谢甲涛 ; 陈桃 ; 姜道宏 ; 付艳萍
- 年：2016
- 作者机构：湖北省作物病害监测和安全控制重点实验室(华中农业大学);农业微生物学国家重点实验室(华中农业大学);
- 论文关键词：盾壳霉 ; 产孢 ; T-DNA插入突变体
- 会议召开时间：2016-08-05
- 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
- 语种：中文
- 分类号：S432.4;S476.1
- 学会代码：ZGVS
- 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
- 会议地点：中国江苏南京
- 主办单位：中国植物病理学会
- 学会名称：中国植物病理学会
- 页数：1
- 文件大小：53k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
盾壳霉(Coniorhyrium minitans)是核盘菌(Sclerorinia sclerotsorum)的重寄生菌,其产孢和寄生能力对于菌核病的防治至关重要。为了从分子水平上研究盾壳霉产孢和寄生菌核的机制,实验室在前期构建了盾壳霉ZS-1菌株的T-DNA标记插入突变体库。我们对其中三个产孢异常的突变体ZS-1TN15322、ZS-1TN16231和ZS-1TN24363进行了深入研究。通过Hi-tail PCR扩增出了ZS-1TN15322的T-DNA插入侧翼DNA片段,根据该序列在盾壳霉基因组中进行比对,发现该突变体中T-DNA标记插入一个基因的启动子区域,该基因CMZS1_06889全长为896bp,无内含子,推定编码一个297aa的蛋白。对推定的氨基酸序列进行功能预测,发现该序列含有保守区域GAT1_cyanophycinase。该氨基酸序列与其他真菌的藻青素酶具有66%的同源性。通过Hi-tail PCR扩增出了ZS-1TN16231的T-DNA插入破坏的编码F-Box蛋白基因,该基因CMZS1_04523与其他真菌中的F-Box蛋白基因只有31%的同源性,基因全长2 435bp,包含3个内含子和4个外显子,推定编码一个504 aa的蛋白,T-DNA标记插入该基因的启动子区域,距离起始密码子353bp处。通过Hi-tailPCR确定了ZS-1TN24363突变体的TDNA插入破坏了一个编码转录因子CMR1的基因,该基因CMZS1_076383与其他真菌的转录因子编码基因CMR1具有72%的同源性,基因全长3 167bp,包含两个内含子和3个外显子,推定编码1 011个氨基酸。同时我们利用Split-Marker重组技术构建了这些基因的重组片段,并通过PEG-原生质体方法对盾壳霉ZS-1菌株进行转化,获得了相关基因敲除的转化子,并利用PCR对转化子进行了初步鉴定,转化子的生物学特性正在研究中。
引文