利用叶蝉细胞瞬时表达系统研究水稻瘤矮病毒在介体细胞内的增殖机制
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- 论文作者：王海涛 ; 张晓峰 ; 谢云杰 ; 王娟 ; 陈红燕 ; 魏太云
- 年：2016
- 作者机构：福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室;
- 论文关键词：昆虫培养细胞 ; 瞬时表达载体 ; 水稻瘤矮病毒 ; 病毒原质
- 会议召开时间：2016-08-05
- 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
- 语种：中文
- 分类号：S435.11
- 学会代码：ZGVS
- 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
- 会议地点：中国江苏南京
- 主办单位：中国植物病理学会
- 学会名称：中国植物病理学会
- 页数：1
- 文件大小：45k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
很多动植物病毒以昆虫作为媒介进行传播,由此引发的病毒病害严重影响人畜健康和粮食生产安全。由于昆虫介体本身体积小,寿命短,各种器官组织非常精细复杂,而且很多病毒基因组结构复杂,目前尚不易得到侵染性克隆,不能利用反向遗传学的手段进行研究。因此,昆虫细胞系结合相应的瞬时表达载体系统,是研究无侵染性克隆病毒在细胞内增殖必不可少的技术手段。目前,叶蝉细胞系广泛地应用于植物呼肠孤病毒的研究中,然而缺少叶蝉细胞特异的瞬时表达载体,导致无法更深入地探索水稻病毒在叶蝉细胞内的增殖机制。本研究通过定位和克隆黑尾叶蝉actin基因的promoter序列,首次开发建立了能在叶蝉细胞中高效瞬时表达的载体系统。通过优化转染条件,该系统目前可以转染飞虱、叶蝉以及sf9等昆虫细胞并表达多种外源蛋白。同时利用该系统验证水稻瘤矮病毒RGDV非结构蛋白Pns7、Pns9和Pns12的细胞定位以及它们与主要的结构蛋白P3、P5、P8之间的互作情况,进一步完善了RGDV病毒原质(Viroplasm)形成的分子机制以及其招募结构蛋白的机理。该系统扩宽了昆虫细胞系的平台优势,为研究水稻病毒和昆虫互作机制提供了有力的工具。
引文