C57BL/6小鼠EAE模型CNS中IBA1、IL-10及IL-1β的动态表达及其发病机制的探讨
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摘要
目的 :建立MOG35-55的C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,检测其发病早期,高峰期和恢复期脑组织中与免疫调节相关的小胶质细胞(IBA1)、各时期促炎因子(如IL-1β)及抗炎因子(如IL-10)的表达的动态变化,神经功能评分和体重计数变化。方法:将C57BL/6雌性小鼠随机分成正常对照组和EAE组,建立EAE模型,皮下注射MOG混合剂,于第0、2天腹腔注射PTX,正常组注射PBS。对小鼠每天采取神经功能评分和体重的测量。在免疫后各发病阶段取其脑脊髓组织制成连续石蜡切片行HE染色,Luxol Fast Blue-Eosin双染,观察其炎症细胞和髓鞘脱失情况。免疫组化法测定脑脊髓组织小胶质细胞标志物(IBA1)、免疫因子白介素因子10(IL-10)、白介素因子(IL-1β)的表达。结果 :早期组的炎症主要累及脑脊髓实质内的小静脉。周围蛛网膜下腔内可见少许量的炎细胞浸润,并常形成小面积的炎性细胞灶。典型的炎性细胞浸润损害出现疾病的高峰期,显示在大脑和脊髓实质和边缘,蛛网膜下腔和小血管充血的侧脑室脉络丛周围,主要单核淋巴细胞浸润。也可见延血管分布,呈条索状,表现为小而深染的细胞核。在海马CA3区伴不同程度的神经元椎体细胞缺损丢失。IFB染色显示脑白质出现蓝色区域大小不等的片状脱髓鞘区,或空泡变性。脊髓前索及侧索及脑白质内均有片状脱髓鞘区,蓝色髓鞘区域染色变淡,伊红染色呈红色。髓鞘结构松散,崩解,断裂,脱失,脱髓鞘斑块边缘呈参差不齐,结构不清晰。晚期组病灶可累及皮层灰质。小胶质细胞IBA1、IL-1β、IL-10发病早期活化较少,在脑和脊髓组织的炎性浸润及髓鞘脱失区域周围,可见中性粒细胞、淋巴细胞浸润及小胶质细胞活化,多数位于小血管周边。高峰期在血管及炎症细胞,脉络丛旁聚集处可见大量活化小胶质细胞IBA1阳性细胞,且深染增大的细胞体,棘突回缩明显,形态多变。IL-1β在血管旁,蛛网膜下腔都可见弥漫性的表达,分布均匀,强阳性表达,而IL-10则明显减少,甚至消失。病情缓解期阶段炎症细胞减少,但在脑白质出现大量小胶质细胞IBA1阳性细胞,棘突明显增多,形态规则。同时,可见因子IL-10大量表达,IL-1β表达也相对增多。结论 :脑脊髓组织中IL-1β和IL-10与小胶质细胞之间存在协同的神经保护作用关系。
引文