DNA提取法对PCR扩增检测进境油菜籽携带茎基溃疡病菌的影响
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- 论文作者：宋培玲 ; 皇甫海燕 ; 郝丽芬 ; 燕孟娇 ; 石嵘 ; 贾晓清 ; 皇甫九茹 ; 吴晶 ; 李子钦
- 年：2016
- 作者机构：内蒙古农牧业科学院植物保护研究所;内蒙古大学生命科学学院;
- 论文关键词：油菜籽 ; 茎基溃疡病 ; DNA提取 ; PCR检测
- 会议召开时间：2016-08-05
- 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
- 语种：中文
- 分类号：S435.654
- 学会代码：ZGVS
- 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
- 会议地点：中国江苏南京
- 主办单位：中国植物病理学会
- 学会名称：中国植物病理学会
- 页数：1
- 文件大小：34k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
2009年,我国将油菜茎基溃疡病列入进境植物检疫性有害生物名录,为建立适于进境油菜籽携带茎基溃疡病菌的DNA提取及检测方法,比较分析了5种DNA提取法对PCR扩增检测的影响。采用PVP、CTAB、Kit以及PVP+Kit、CTAB+Kit 5种方法对带菌种子进行DNA提取。特异性扩增结果显示,以PVP、CTAB、Kit 3种方法所得DNA为模板时,检出率为零;以PVP+Kit法所得DNA为模板时,有特异性条带出现但较弱,且检出率不稳定;以CTAB+Kit法提取的DNA为模板时,检出率高,且重复率好,该提取法不仅保证了油菜籽带菌量较低时,所得总DNA中茎基溃疡病菌DNA的微量存在,且其含量可满足进一步PCR检测的要求,特异性扩增可有效检出1 000粒或10 000粒种子中1~2粒种子所携带的病菌。即CTAB+Kit这种大量与微量相结合的DNA提取法,适于进境油菜籽携带茎基溃疡病菌的检测。
引文