CD226参与同种异体移植排斥反应的机制研究
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摘要
目的:探讨CD226分子参与调控同种异体移植物免疫排斥反应的机制。方法:体外实验,利用混合淋巴细胞反应(Mixed Lymphocyte Reaction,MLR),观察CD226配体CD155分子在抗原呈递细胞表达的动态变化,效应细胞表面CD226、TIGIT分子的表达变化水平;加入CD226单抗或CD226-Fc融合蛋白阻断CD226信号,检测MLR体系中Treg比例及对淋巴细胞增殖和杀伤活性的影响;观察CD226、TIGIT单抗单独或联合应用阻断CD226、TIGIT信号后,MLR体系中淋巴细胞增殖的影响。体内实验,C57/B6小鼠分为三组,进行Balb/c同种异体皮片移植:A组为空白对照组、B组为给予雷帕霉素治疗组、C组(雷帕霉素+CD226单抗组),观察CD226单抗联合雷帕霉素对皮片移植排斥反应的影响。观察皮片存活时间,在移植后第10天取各组受体脾脏淋巴细胞进行混合淋巴细胞反应,观察各实验组淋巴细胞对供体抗原反应性的差异。在各组皮片排斥终点,检测受体脾脏、引流淋巴结和非引流淋巴结Treg细胞比例变化。同时,取移植皮片进行病理学检查。结果:经MLR后,刺激细胞CD155表达水平和反应细胞CD226及TIGIT表达水平均显著增高。CD226单抗或融合蛋白阻断CD226信号后,MLR体系中Treg比例显著增高(P<0.01),淋巴细胞增殖水平和杀伤能力显著下降(P<0.05)。TIGIT单抗阻断TIGIT信号后,可以逆转CD226单抗引起的淋巴细胞增殖水平降低。在体皮片移植中,C组皮片存活时间较B组和A组显著延长(P<0.01),移植后第10天受体脾脏淋巴细胞对供体抗原反应性显著降低(P<0.01)。各组受体小鼠至皮片排斥终点时,C组受体脾脏、引流淋巴结和非引流淋巴结中,Treg细胞比例较B组和A组显著增高(P<0.05)。病理学检查结果示C组皮片炎症细胞浸润程度显著减轻。结论:阻断CD226信号可以促进Treg细胞扩增,显著降低MLR中淋巴细胞增殖和杀伤水平;在体内实验中,调控CD226信号可以延长同种异体移植物存活时间,其机制可能在于CD226单抗阻断了其对CD155分子的刺激信号,从而加强了其竞争性受体TIGIT的活化有关。
引文