组成型融合表达鸡致病性大肠杆菌fimA与ompC蛋白重组乳酸杆菌的构建及其在鸡肠道定殖特性的研究
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- 论文作者：韩乐濛 ; 姜艳平 ; 崔文 ; 王丽 ; 周晗 ; 乔薪瑗 ; 徐义刚 ; 唐丽杰 ; 李一经
- 年：2016
- 作者机构：东北农业大学动物医学学院;
- 论文关键词：禽致病性大肠杆菌 ; FimA蛋白 ; OmpC蛋白 ; 重组鸡源乳酸杆菌 ; 定植特性
- 会议召开时间：2016-09-18
- 会议录名称：第六届中国兽药大会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of 2016 the 6th China Congress of Veterinary Medicine
- 语种：中文
- 分类号：S852.61
- 学会代码：ZGXJ
- 会议名称：第六届中国兽药大会
- 会议地点：中国四川成都
- 主办单位：中国兽医药品监察所、中国兽药协会
- 学会名称：中国畜牧兽医学会
- 页数：2
- 文件大小：143k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
禽大肠杆菌病是由致病性大肠埃希氏菌(APEC)感染引起的多种临床病型总称,主要表现有胚胎和幼雏的死亡、败血症、气囊炎、心包炎、输卵管炎、肠炎、腹膜炎和大肠杆菌性肉芽肿等。由于致病性大肠埃希氏菌血清型众多,抗原结构复杂,给防治本病带来了困难。因此,探寻致病性大肠杆菌免疫保护谱广的抗原物质,进行肠道黏膜免疫,对特异性防治该病具有重要的实践意义。为获得理想的传递抗原物质的载体菌,本研究从健康鸡肠道中分离鉴定出8株乳酸杆菌,分别是3株Lactobacillus crispatus、2株Lactobacillus johnsonii、2株Lactobacillus salivarius和1株Lactobacillus saerimneri,8株乳酸杆菌在37℃和42℃均能良好生长。同时,对上述乳酸杆菌的肠道粘附能力和耐药性进行了检测,结果显示,8株乳酸杆菌均具有一定的肠道粘附特性,可在肠道内定殖,且对多种抗生素敏感。基于上述实验表现,本研究选择L.saerimneri作为传递免疫抗原物质的活载体菌,进而研制预防禽大肠杆菌的免疫制剂。选择APEC FimA和OmpC作为免疫抗原,构建了组成型融合表达mpC和FimA的基因工程乳酸菌系统pPG-T7g10-PPT-OmpCFimA/L.saerimneri。经Western blot检测结果显示,融合蛋白OmpC-FimA在重组乳酸杆菌中获得表达,出现了约101kDa的特异性免疫印迹带。重组乳酸杆菌pPG-T7g10-PPTOmpC-FimA/L.saerimneri在鸡肠道内定殖能力研究结果显示:重组乳酸杆菌可耐受pH 3.0的酸性环境,且在0.1%的胆汁酸盐环境中能够良好生长;重组乳酸杆菌可在鸡肠道内定殖,在口服给菌后的第28天,重组乳酸杆菌的数量仍保持稳定,可见重组乳酸杆菌能够在鸡肠道内定殖;饲喂重组乳酸杆菌可使肉仔鸡的日增重明显增加。研究结果说明,重组乳酸杆菌pPG-T7g10-PPT-OmpC-FimA/L.saerimneri能够在鸡肠道内定殖,具有益生菌的特性,为防制由APEC引起的禽大肠杆菌病提供物质基础。
引文