禾谷镰刀菌FgSAD1基因在前体mRNA剪接中的功能研究
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摘要
在酿酒酵母及人类中,Sad1蛋白参与了剪接过程中U4/U6 di-snRNP的装配,有助于维持U4/U6·U5 tri-snRNP的完整性。然而,我们对Sad1蛋白在剪接过程中具体的功能知之甚少。据之前的研究报道,在禾谷镰刀菌Fgprp4突变体恢复生长速率的角变子中测到基因FgPRP6、FgPRP8、FgBRR2、FgPRP31上出现角变位点。本实验对310个角变子的FgSAD1基因测序,共测到14个角变子,7个角变位点。这7个位点分别位于基因的3个区域。尽管14个角变子均恢复了菌丝的生长速率,但它们在有性生殖及致病方面仍存在缺陷。我们验证了FgSad1中角变位点L512P能够恢复Fgprp4缺失突变体的生长速率。与酿酒酵母中的同源基因相比,FgSAD1基因具有一段特殊的富含丝氨酸与精氨酸的N端序列。本实验对N端的70个氨基酸进行敲除,突变体具有生长速率变缓并容易角变的特征,说明N端序列对于FgSad1的功能具有重要作用,FgPrp4的磷酸化位点可能位于该区域。
引文

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