N-乙酰基-D-半乳糖胺缓解大豆凝集素对猪小肠上皮屏障损伤的研究
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摘要
本文通过两个试验,研究拮抗物N-乙酰基-D-半乳糖胺能否有效减弱大豆凝集素对仔猪小肠上皮细胞机械屏障的损伤。试验一研究N-乙酰基-D-半乳糖胺减弱大豆凝集素对猪小肠上皮细胞通透性的影响。本试验预先加入浓度为0、0.125×10~(-4)、0.25×10~(-4)、0.5×10~(-4)、1.0×10~(-4)、2.0×10~(-4)mmol/L的N-乙酰基-D-半乳糖胺,处理细胞1、2、4、8 h后,再加入0.5 mg/mL的大豆凝集素处理24 h。试验二研究了N-乙酰基-D-半乳糖胺减弱大豆凝集素对猪小肠上皮细胞紧密连接蛋白及其基因相对表达量的影响。分为空白组(不添加任何刺激物)、对照组(只加大豆凝集素)和处理组(先加拮抗物再加大豆凝集素)三个组。试验结果表明:试验一中N-乙酰基-D-半乳糖胺减缓了细胞TEER值下降,也降低了细胞培养液中AP的活性。试验二中对照组细胞间紧密连接蛋白Occludin和Claudin-3的相对表达量分别降低了17.8%和43.5%(P<0.05)。处理组细胞间紧密连接蛋白Occludin和Claudin-3的相对表达量显著下降OP<0.05),分别降低了4.3%和7.2%。对照组Occludin mRNA和Claudin-3 mRNA水平均极显著下降(P<0.01),分别下降了17.3%和42%。处理组Occludin mRNA水平差异不显著(P>0.05),下降了1.6%,而Claudin-3 mRNA水平差异极显著(P<0.01),下降了2.7%。综上所述:在体外培养条件下,适宜浓度的N-乙酰基-D-半乳糖胺抑制了大豆凝集素对仔猪小肠上皮细胞屏障通透性的影响。大豆凝集素抑制了小肠上皮细胞紧密连接蛋白的合成,加入拮抗物N-乙酰基-D-半乳糖胺后减弱了大豆凝集素对细胞紧密连接蛋白合成的抑制作用。N-乙酰基-D-半乳糖胺能够减弱大豆凝集素对仔猪小肠上皮细胞屏障功能的损伤作用。
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