蜘蛛粗毒抗弓形虫作用的初步研究
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摘要
目的:蜘蛛的数量仅次于昆虫,其毒液成分相当复杂,含量丰富的是分子量2-8 KDa的多肽,具有重要的科学研究价值和良好的应用前景。弓形虫对人类健康危害非常严重,目前临床上抗弓形虫药物存在毒副作用大、疗程长、停药易复发等缺点,因此,寻找抗弓形虫的候选药物仍然具有重要意义。家蝇抗菌肽和蝎毒多肽有抗弓形虫作用的报道,而蜘蛛多肽抗弓形虫作用还未见报道,蜘蛛毒液是一个急需开发的巨大的药物资源库和工具试剂库。方法:通过弓形虫的体外实验和体内实验,观察我国特有的3种蜘蛛(虎纹捕鸟蛛、敬钊缨毛蛛、海南捕鸟蛛)粗毒抗弓形虫效果,并初步探索抗弓形虫的作用机制。结果:(1)MTT法结果表明敬钊缨毛蛛毒素的细胞毒性最强,其半数细胞毒性浓度TC_(50)为32.7μg/ml;其次是虎纹捕鸟蛛毒素,TC_(50)为41.2μg/ml;而海南捕鸟蛛毒素的细胞毒性最弱,TC_(50)为109μg/ml。(2)当敬钊缨毛蛛毒素浓度为32.7μg/ml和4.1μg/ml时,感染前处理中弓形虫的感染率分别是14.3%和25.7%;感染后处理中弓形虫的感染率分别是11.9%和25.5%,均明显低于对照组(P<0.05);且两种处理方式中,在浓度为32.7μg/ml时,纳虫泡内虫体均数低于对照组(P<0.05)。虎纹捕鸟蛛毒素浓度为41.2μg/ml和10.3μg/ml时,感染前处理中弓形虫的感染率分别是16.4%和23.9%;感染后处理中弓形虫感染率分别是15%和23.9%,均明显低于对照组(P<0.05)。海南捕鸟蛛毒素毒素在两种处理方式中,细胞感染率与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。(3)蜘蛛毒素处理24h时,阴性对照组弓形虫感染率为40.8%,敬钊缨毛蛛毒素组感染率为20.2%,虎纹捕鸟蛛毒素组感染率为20.5%;而蜘蛛毒素处理48h时,阴性对照组弓形虫感染率为85%,敬钊缨毛蛛毒素组弓形虫感染率为13%;虎纹捕鸟蛛毒素组感染率为36.3%。(4)体内实验结果表明敬钊缨毛蛛毒素组和虎纹捕鸟蛛毒素组小鼠平均存活天数分别长于10.5天和14天,明显长于未治疗组小鼠平均存活天数(6.83天),且虎纹捕鸟蛛毒素组差异有显著性(P<0.05)。结论:虎纹捕鸟蛛毒素和敬钊缨毛蛛毒素对体外弓形虫均有抗虫效应,与毒素浓度呈正相关关系,虎纹捕鸟蛛毒素可明显提高弓形虫感染鼠的存活天数,而海南捕鸟蛛毒素抗弓形虫作用不明显。
引文

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