表达绿色荧光蛋白的猪种布鲁氏菌的构建

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• 论文作者：董炳梅 ; 王金良 ; 吕素芳 ; 孙培娇 ; 张春玲 ; 沈志强
• 年：2016
• 作者机构：山东绿都生物科技有限公司;山东省滨州畜牧兽医研究院;
• 论文关键词：表达 ; 构建 ; 绿色荧光 ; 布鲁氏菌
• 会议召开时间：2016-09-18
• 会议录名称：第六届中国兽药大会论文集
• 英文会议录名称：Proceedings of 2016 the 6th China Congress of Veterinary Medicine
• 语种：中文
• 分类号：S852.61
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：第六届中国兽药大会
• 会议地点：中国四川成都
• 主办单位：中国兽医药品监察所、中国兽药协会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：1
• 文件大小：48k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

为了更直观的观察猪种布鲁氏菌在宿主细胞/宿主体内的活动规律,本研究首先应用PCR技术扩增pEGFP-N1质粒的N1基因,与PMD-18T载体连接后,成功构建PMD18-N1质粒;进而应用Xbal Ⅰ与SacⅡ限制性内切酶,将PMD18-N1质粒与pBBR1MCS-6质粒分别进行双酶切,并将N1片段反向连接于PBBR1MCS-6载体上,经菌液PCR鉴定与双酶切鉴定,证明成功构建了PBBR1MCS-N1质粒;在此基础上,应用电转化实验,将PBBR1MCS-N1质粒转化猪种布鲁氏菌感受态细胞,通过含氯霉素的TSA培养基筛选、PCR鉴定与荧光鉴定,最终获得了可稳定表达绿色荧光的猪种布鲁氏菌。

引文