液相色谱高分辨静电场轨道离子肼质谱检测12种类固醇药物
详细信息 查看官网全文
- 论文作者：陆江海 ; 何根业 ; 吴筠 ; 徐友宣
- 年：2016
- 作者机构：国家体育总局反兴奋剂中心;
- 论文关键词：LCQ-orbitrap MS ; 蛋白同化制剂 ; 兴奋剂检测
- 会议召开时间：2016-10-21
- 会议录名称：第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康论文摘要汇编
- 语种：中文
- 分类号：R872
- 学会代码：ZGTK
- 会议名称：第四届（2016）全国运动生理与生物化学学术会议——运动·体质·健康
- 会议地点：中国江苏无锡
- 主办单位：中国体育科学学会运动生理与生物化学分会
- 学会名称：中国体育科学学会
- 页数：2
- 文件大小：95k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
研究目的:类固醇药物特别是代谢物的研究一直是兴奋剂检测领域永恒的话题。由于这些代谢物极性较小同时内源性干扰比较多,在人体内的浓度较低,所以发现这些代谢物一直是兴奋剂检测实验室的研究重点和难点。本课题建立了能同时检测包括司坦唑醇、前列他唑代谢物共12种物质在内的液相色谱高分辨静电场轨道离子肼质谱方法,以提高和改善常规检测能力,对滥用这些药物的运动员能起到震慑作用。研究方法:在试管中加入5微升甲睾内标溶液(2ng/uL),1毫升0.1M磷酸缓冲液,加入50微升β-葡萄糖醛酸苷酶溶液,55℃恒温水浴保温60分钟。取出样品冷却至室温,加入0.5毫升碱性缓冲液,加入4毫升叔丁基甲基醚,涡旋振荡,离心,冷冻后转移出上层有机相,55℃加热下氮气吹干。向吹干后的残渣中加入150uL溶解用流动相,充分震荡后转移至尖底小瓶中,压盖后准备进样分析。液相条件:流动相流速:0.25ml/min;液相色谱柱:Hypersil GOLD 1.9mm'100mm'2.1mmid;柱温箱控制:30℃;离子化模式:ESI(正模式采集);干燥气流量:11L/min(350℃);鞘气压力:50psi;扫描模式:平行选择离子监测模式(PRM)。研究结果:建立了12种类固醇的常规筛查方法,并对该检测方法进行了方法验证工作。12种药物检出限均小于1ng/mL,且都比WADA要求的最低检测要求低10倍,回收率均高于50%,在高中低三个浓度(0.5 ng/mL、2.5ng/mL、5ng/mL)日内及日间精密度均低于16%,满足世界反兴奋剂机构(WADA)技术文件中低于20%的要求。研究结论:本研究建立了人尿中筛查12种类固醇药物的前处理方法和液相色谱高分辨质谱方法,对该方法进行了方法验证工作,满足世界反兴奋剂机构技术文件的要求。
引文