奶牛源MRSA菌株的分离鉴定和耐药性分析
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摘要
奶牛乳房炎是阻碍奶牛养殖业发展最主要的奶牛疾病之一,导致严重的经济损失,病原菌是引起奶牛乳房炎的主要原因,其中金黄色葡萄球菌是奶牛乳房炎主要病原微生物之一,可产生溶血毒素、肠毒素、血浆凝固酶、耐热核酸酶等毒素,引起急性、慢性和亚临床性(隐性乳房炎)乳房炎。对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillin-Susceptive Staphylococcus aureus,MSSA)获得甲氧西林抗性决定子mec A基因后可转化为耐药性更卓越的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus,MRSA)。由于mec A基因编码产生了一种新的青霉素结合蛋白PBP2a,其特性是对β-内酰胺类抗生素(包括青霉素类、头孢菌素类和单酰胺类)的亲和力很低,与以往青霉素耐药机制不同,普通的耐药菌株产生青霉素酶,破坏青霉素的结构使其失效;而产PBP2a的MRSA菌株对β-内酰胺类抗生素亲和力很低且具有转肽酶的功能,以至于内环境中的β-内酰胺类抗生素无法与其紧密结合而减弱酶活力,因此细菌细胞壁粘肽层正常合成,细菌结构完整,生长照常,从而表现出耐药性。MRSA致病性强,病死率高,且呈多重耐药,给人类及动物带来严重危害。本研究对部分奶牛场采集的502份CMT(California Mastitis Test,CMT)检测呈阳性的奶样进行细菌分离、鉴定,运用多重PCR方法筛选出MRSA,并对分离出的MRSA用纸片扩散法进行药敏试验,检测其对19种抗菌药物的敏感性。结果显示,分离到细菌的奶样有452份,其中检出葡萄球菌338株,MRSA 89株;而后对MRSA分离株进行药敏试验,发现其主要对万古霉素、磷霉素、氯霉素和克拉霉素敏感,对青霉素、多粘菌素、大观霉素及头孢他啶具有较强的耐药性。具体表现为高达96.62%的MRSA对青霉素表现为耐药,而抑菌效果最好的是万古霉素,抑菌率达92.13%。虽然如此,仍然出现了对万古霉素耐药的菌株,因此建议各农牧场合理规范使用抗生素并做好病原微生物及其耐药基因的监测,结合实际指导用药,防止耐药菌株进一步扩散与流行。
引文

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