鸡干扰素刺激基因的抗病毒机制
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摘要
禽白血病病毒(ALV)是一种逆转录病毒,该种病毒已经造成了鸡的家禽业的重大经济损失。鸡Ⅰ型干扰素IFN-α是一种重要的抗病毒因子,有研究证实一些干扰素刺激基因能编码具有直接抗病毒活性潜能的蛋白质。然而,大部分干扰素刺激基因的抗病毒作用的机制尚未清楚。本研究试图去探究干扰素刺激基因的抗病毒机制。实验设置2个处理:正常DF1接毒(HN06)组;干扰素IFN-α+HNO6组。取6h、24h、48h、72h的细胞培养上清及RNA。Elisa检测细胞培养上清液的s/p值,荧光定量PCR检测禽白血病病毒gp85,以及干扰素刺激基因CH25H、PKR、OAS、MX、ISG12、ZAP的mRNA的表达水平。结果显示,6h HNO6、6h IFN-α+HNO6和24h HNO6、24h IFN-α+HNO6的细胞培养上清中未检测到明显的P27(s/p<0.2),但是48h HNO6、48h IFN-α+HNO6和72h HNO6、72h IFN-α+HNO6的细胞培养上清中检测到P27(s/p大于0.2);在mRNA的表达水平上,24h IFN-α+HNO6中gp85表达显著低于24h HNO6、48h IFN-α+HNO6中gp85表达显著低于48h HNO6,而72h IFN-α+HNO6中gp85表达水平却显著高于48h HNO6。与此同时干扰素刺激基因CH25H、OAS、ISG12、ZAP均在6h IFN-α+HNO6、24h IFN-α+HNO6、48h IFN-α+HNO6中具有高表达,但表达量与时间长度成反比趋势下降,在72h IFN-α+HNO6中表达最低,符合gp85表达显著的表达规律,推测随着时间的延长,干扰素的效果会减弱。综上,初步推测CH25H、OAS、ISG12、ZAP为具有抗病毒功能的干扰素刺激基因。
引文