黑水虻抗菌肽的分离提取及对CNE2细胞生物活性的影响

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• 论文作者：田忠 ; 廖业 ; 夏嫱
• 年：2016
• 作者机构：遵义医学院;
• 论文关键词：黑水虻抗菌肽 ; CNE2细胞 ; 细胞增殖 ; 端粒酶
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R284;R285
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：1
• 文件大小：1220k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

目的:本研究通过黑水虻抗菌肽提取分离及研究其对人鼻咽癌CNE2细胞增殖效应和端粒酶活性的影响,探究黑水虻抗菌肽活性组分对CNE2细胞的作用机制。方法:利用金黄色葡萄球菌菌液针刺诱导,再经透析、凝胶过滤层析结合反高效液相色谱法逐级分离纯化抗菌肽;用CCK-8法检测不同浓度抗菌肽H3对CNE2细胞体外增殖的影响;Hoechst33342染色法检测抗菌肽H3对细胞形态影响;细胞划痕实验检测抗菌肽H3对CNE2细胞愈合能力的影响;实时荧光定量PCR法检测抗菌肽H3对CNE2细胞端粒酶活性的影响。结果:从黑水虻血淋巴中提取得到3种纯度较高的组分(H1、H2、H3);抑菌实验结果显示抗菌肽H3对革兰阳性菌和革兰阴性菌抑菌活性与H1及H2相比显著增加。研究表明,抗菌肽H3能显著抑制CNE2细胞增殖,而对正常细胞HUV-C则无明显作用;抗菌肽H3可使CNE2细胞膜通透性增强,细胞核出现固缩、核裂解等凋亡现象,并且能一定程度抑制CNE2细胞的愈合能力;抗菌肽H3可使CNE2细胞中端粒酶逆转录酶(TERT)的表达量下调。结论:黑水虻活性抗菌肽可经金黄色葡萄球菌菌液诱导产生,其活性组分—抗菌肽H3可抑制CNE2细胞增殖,破坏其细胞膜,增强膜通透性,同时使CNE2细胞端粒酶活性下调。

引文