香菇dsRNA病毒的分离鉴定及致病性初步研究
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摘要
香菇(Lentinula edodes)代料栽培中常会出现菌丝衰退、转色异常、子实体无法形成或萎蔫畸形等症状,人们推测这些症状与病毒有关。采取ds RNA方法从本实验室构建的香菇核心种质资源库和各地收集的出现异常症状的菌株中共分离出6条ds RNA,并进行了基因序列测定。根据序列开发了相应病毒的RT-PCR检测体系。RT-PCR分析显示,香菇核心种质中最常见的病毒是L.edodes partitivirus 1(Le PV1),带毒率达到48.2%(27/56),其次是L.edodes mycovirus HKB(Le V-HKB)(12.5%,7/56)。其中Le PV1是一种新的双分体病毒,ds RNA-1和ds RNA-2的序列长度分别为2382 bp和2245 bp,组装成直径34 nm的球形粒子。Le PV1在菌丝衰退菌株中的浓度远高于携带此病毒的正常菌株,表明菌丝衰退与Le PV1的浓度存在某种关联。Le V-HKB是香菇中被广泛报道的一种潜隐性病毒。研究表明,高浓度的Le V-HKB同样可以引起菌丝衰退。采用100μg/m L的病毒唑对Le V-HKB进行不同周期的脱毒处理,当病毒浓度降低至一定程度后,菌丝能恢复正常生长。香菇菌丝在不同温度下生长时,28℃以上温度即可显著抑制Le V-HKB的复制。当香菇菌丝长满培养皿后,再置于不同温度下处理24 h,结果显示在25~37℃温度范围内,Le V-HKB的表达量会随着温度的升高而增加,暗示携带Le V-HKB的菌丝遇长时间高温可能会显现某些退菌症状。Le PV1可以和Le V-HKB共同侵染香菇,且Le V-HKB能显著促进Le PV1 Rd Rp基因的表达。
引文
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