一株泰山枯草芽孢杆对黄曲霉毒素B1的降解研究
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摘要
黄曲霉毒素(Aflatxoin,AFT)是由黄曲霉(As-pergillus flavus)、寄生曲霉(Aspergillus parasiti-cus))等多种真菌产生的次级代谢产物,其中分布范围最广、化学性质最为稳定的为黄曲霉毒素B 1(Afalatoxin B1,AFB1)。目前,利用微生物及其代谢产物对黄曲霉毒素进行生物解毒,具备效果稳定、特异性强及效率高等优势而成为研究的热点。在微生物降解黄曲霉毒素方面,已经研究了有不同的微生物,细菌如红色棒状杆菌(Mann and Rehm,1977;Wu et al.,2009),荧光假单胞菌,败血假单胞菌,葡萄球菌(Oluwaffemi et al.,2016),真菌如假蜜环菌(Liu et al.,2001),平谷菌(Yehia,2014)。使用安全、特异性强、降解效率高,是解决黄曲霉毒素污染的首要任务。泰山属暖温带季风气候,地表植物种类繁多,土壤主要由棕壤组成,富含矿物质和有机质成分,非常适合微生物包括枯草芽孢杆菌的生长。为此,本试验首次从泰山土壤中分离对AFB1具有高降解作用的枯草芽孢杆菌,并对其降解过程进行了初步研究,为AFB1的生物性降解和霉变饲料控制方面的应用研究奠定基础。枯草芽孢杆菌是对人,家畜是有益的土壤居住菌。该菌能分泌的代谢物中含有大量的活性物质。由于该细菌代谢物对黄曲霉毒素的效果研究未见报道,利用生物方法降解黄曲霉毒素也受到了广泛的关注。因此,本实验从土壤中分离了枯草芽孢杆菌,并进行了鉴定。经16sRNA基因测序鉴定为枯草芽孢杆菌,最终确定1株具有较高降解作用的枯草芽孢杆菌。并利用该菌株的代谢物对AFB1进行了降解率、代谢物活性组分、性质的确定及降解饲料中AFB1效果的研究。结果表明,泰山枯草芽孢杆菌代谢物对AFB1的降解率达90.28%,其中,泰山枯草芽孢杆菌发酵后的上清液对AFB1的降解活性最高,确定发酵后的上清液中存在解毒活性组分;对解毒活性物质进行加热和蛋白酶K变性处理后,解毒活性显著降低,表明起解毒作用的活性物质是其分泌的一种胞外酶;应用性试验也证明了该菌的代谢产物对对霉变饲料中黄曲霉毒素的降解作用。总之,此次枯草芽孢杆菌代谢物对黄曲霉毒素B1的有效降解,显示了枯草芽孢杆菌在饲料和饲料行业中应用潜力。
引文
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