CaSR介导色氨酸诱导猪十二指肠胃肠激素分泌

详细信息    查看官网全文

• 论文作者：王超 ; 县怡涵 ; 赵秀英 ; 杨黎明 ; 朱伟云 ; 杭苏琴
• 年：2016
• 作者机构：南京农业大学消化道微生物研究室;
• 论文关键词：色氨酸 ; CaSR ; 猪 ; 十二指肠 ; 胃肠激素
• 会议召开时间：2016-10-21
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S828
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会
• 会议地点：中国湖北武汉
• 主办单位：中国畜牧兽医学会动物营养学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：1
• 文件大小：60k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

色氨酸(Trp)属于芳香族氨基酸,它可以通过激CaSR调控人和鼠小肠胃肠激素分泌。本试验利用体外表面灌流系统,旨在研究CaSR对Trp诱导猪十二指肠胃肠激素的介导作用及其下游信号通路的参与机制。屠宰场采集猪十二指肠新鲜样品,PBS液洗净后剪成约1 mm~2组织块,混匀后随机装入灌流小室,每室400 mg,将通入氧气的培养液以6 mL/h的速度预灌流40 min,随后进行正式实验:1)以Kreb's液为基础液,研究0、20、50 mmol/L的Trp对CaSR表达及胃肠激素分泌的影响,筛选最适Trp浓度;2)Trp溶液中加入CaSR抑制剂(NPS 2143),研究Trp是否通过激活CaSR及其下游信号通路促进胃肠激素的分泌。正式试验持续灌流160 min,每10 min收集一次灌流液,测定灌流液CCK、GLP-1和GIP浓度;试验结束后收集猪十二指肠组织,Real-time PCR技术检测CaSR mRNA的表达;Western blot技术,测定不同时间点CaSR及其下游信号蛋白表达。结果发现,与0 mmol/L Trp组相比,20 mmol/L Trp组CCK、GLP-1及GIP的浓度显著升高(P<0.05,n=4),50 mmol/L Trp组GLP-1和GIP的浓度显著升高(P<0.05,n=4),CCK浓度无明显变化(P>0.05,n=4);20 mmol/L Trp与50 mmol/L Trp均显著上调了CaSR、CCK、GIP、GLP-1的基因表达(P<0.05,n=4),与50 mmol/L Trp组相比,20 mmol/L Trp引起的激素分泌及CaSR、CCK、GIP、GLP-1的基因的表达效应更强,且20 mmol/L Trp显著促进CaSR及其下游信号蛋白PKC、IP3R和PKA的表达(P<0.05,n=4),说明20 mmol/L的Trp是诱导胃肠激素分泌的最适添加浓度。当添加CaSR特异性拮抗剂NPS 2143后,20 mmol/L Trp引起激素分泌的作用消失,CCK、GLP-1、GIP浓度显著低于不含抑制剂组(P<0.05,n=4),CaSR及胃肠激素的基因表达也显著下降(P<0.05),CaSR及其下游信号蛋白的表达也明显受到抑制(P<0.05),说明20 mmol/L Trp可能通过激活CaSR引起胃肠激素的分泌。本试验结果说明,20 mmol/L的色氨酸可以促进猪十二指肠CCK、GIP、GLP-1的分泌,这种促分泌作用可能是通过激活CaSR,启动G蛋白偶联的下游信号转导,活化PKA、PKC及促进IP3与IP3R的结合,引起细胞内Ca~(2+)动员实现的。

引文