羊布氏杆菌病快速检测技术基层应用研究
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- 论文作者：葛婷 ; 雷程红 ; 王振宝 ; 卞赛赛
- 年：2016
- 作者机构：新疆农业大学动物医学学院;伊犁出入境检验检疫局;
- 论文关键词：羊 ; 布氏杆菌 ; 环介导等温核酸技术 ; 检测
- 会议召开时间：2016-07-20
- 会议录名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会论文集
- 语种：中文
- 分类号：S858.26
- 学会代码：SYGW
- 会议名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会
- 会议地点：中国内蒙古通辽
- 主办单位：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
- 学会名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
- 页数：7
- 文件大小：604k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
布氏杆菌病是由布氏杆菌引起的以发热和流产为主要特征的人畜共患传染病。布氏杆菌病防控的关键是对病原及早、快速、准确的检测并确诊。目前,用于检测布氏杆菌病的诊断技术耗时长,操作较复杂,有些尚需借助精密仪器方能判定结果,致使这些方法在基层应用中较难普及推广,因此,建立一种适用于基层生产的、简便快速准确的病原诊断方法十分必要。环介导等温核酸技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种能对核酸进行高效扩增,并广泛用于基因快速检测的新型检测方法。LAMP方法与普通PCR方法相比,其灵敏度高,特异性强,对实验室仪器设备要求较低,操作简便。在恒温条件下(60~65℃)1小时内即可扩增出109~1010靶序列拷贝,其结果可用肉眼直接判定。本研究采用三种LAMP方法对羊布氏杆菌病进行检测比较,以期筛选出最适合于基层应用的羊布氏杆菌病快速检测技术。试验通过使用浊度仪LAMP、金属浴LAMP、荧光目视检测试剂盒LAMP和普通PCR共4种方法对162份绵羊血液样品进行检测,布氏杆菌检出率分别为:浊度仪LAMP为9%、金属浴LAMP为9%、荧光目视检测试剂盒为9%、普通PCR为6%。本次试验通过三种不同条件下的LAMP反应与PCR结果的比对,得出三种不同条件下的LAMP检出布氏杆菌阳性率均高于PCR方法。而这三种不同条件的LAMP检出布氏杆菌阳性率相同,重复率相同。综上所述,经不同条件下的LAMP反应得出:在金属浴中进行LAMP方法可行,而金属浴LAMP具有无需昂贵设备及试剂的优势更适合基层检测条件,建议推广。
引文
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