HCV JFH1 NS5A基因对HC-J4病毒复制和感染性影响的研究
详细信息 查看官网全文
- 论文作者：王文博 ; 许刚 ; 曹明媚 ; 任浩 ; 戚中田
- 年：2010
- 会议召开时间：2010-11-13
- 会议录名称：首届中国临床微生物学大会（宁波会议）暨《医学参考报》微生物学与免疫学论坛论文汇编
- 语种：中文
- 分类号：R512.63
- 学会代码：WSWZ
- 会议名称：首届中国临床微生物学大会（宁波会议）暨《医学参考报》微生物学与免疫学论坛
- 会议地点：中国浙江宁波
- 主办单位：中国微生物学会临床微生物学专业委员会
- 学会名称：中国微生物学会临床微生物学专业委员会
- 页数：1
- 文件大小：41k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)2a FL-J6JFHNS5A基因置换对1b HC-J4复制和感染性的影响,从而为建立HCV 1b细胞模型奠定基础。方法将JFH1 NS5A置换至HCJ4基因组内,构建嵌合全长基因组HC-J4/JFHNS5A。体外制备HC-J4野生型和嵌合体以及J6JFH1的RNA转录体,脂质体介导转染Huh-7.5细胞,用免疫荧光检测(immunofluorescence aasay,IFA)、HCV负链RNA特异性RT-PCR法和荧光定量PCR方法(FQ-PCR)检测转染细胞内的蛋白表达和基因复制情况。收集转染细胞上清感染naive Huh-7.5细胞观察其感染性。结果IFA未观察到HC-J4野生型和嵌合体转染细胞内的蛋白表达,但在转染后18天以内的各个时间点,转染细胞内都检测到了HCV负链RNA,表明嵌合体和野生型HC-J4在转染细胞内呈低水平复制。FQ-PCR检测到,转染后第9天和第12天,嵌合体转染细胞内HCV RNA水平高于野生型转染的细胞(p<0.05)。收集不同时间点的转染细胞上清感染naive Huh-7.5细胞后,IFA均未观察到HCV蛋白阳性细胞。结论 JFHI NS5A蛋白虽然在一定程度上可增加1b型HC-J4株在体外培养细胞中的复制能力,但还不足以产生能够检测到的感染性病毒颗粒。HCV 1b细胞模型的建立尚受其他因素的影响。
引文