E3泛素连接酶RNF2负向调控天然免疫抗病毒反应及机制研究
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摘要
研究背景:Ⅰ型干扰素信号通路在天然免疫抗病毒反应中具有重要的作用。病毒感染机体诱导Ⅰ型干扰素产生后,Ⅰ型干扰素能够与细胞表面的Ⅰ型干扰素受体结合,触发下游信号通路的激活,导致转录因子STAT1发生磷酸化,形成ISGF3复合体入核,结合特定的DNA序列,从而启动一系列干扰素刺激基因的表达,发挥抵御病毒感染的作用。因此,对STAT1转录功能的精确调控是天然免疫抗病毒反应的关键。已有研究表明多聚泛素化修饰在天然免疫信号通路的转导中必不可少,但是关于STAT1的多聚泛素化修饰,尤其是非降解功能的多聚泛素化修饰还不够明确。目的:寻找能够修饰STAT1的新的E3泛素连接酶,探索该种修饰对STAT1介导的天然免疫抗病毒反应的影响及其作用机制。方法:分离小鼠原代腹腔巨噬细胞,Ⅰ型干扰素刺激条件下,利用IP-质谱寻找与STAT1相互作用的E3泛素连接酶。RNA干扰及过表达稳筛株分析E3泛素连接酶对STAT1抗病毒功能的影响。结果:Ⅰ型干扰素刺激条件下,E3泛素连接酶RNF2能够与STAT1相互作用并对STAT1进行多聚泛素化修饰;在小鼠原代腹腔巨噬细胞中干扰RNF2的表达后给予病毒刺激,与对照组相比,各种干扰素刺激基因的表达显著上升,相应的病毒复制减少(p<0.05);在RNF2过表达细胞系中给予病毒刺激,与对照细胞系相比,各种干扰素刺激基因表达显著下调,病毒复制增加(p<0.05)。结论:RNF2能够通过对STAT1进行泛素化修饰,从而负向调控STAT1所介导的天然免疫抗病毒反应。
引文