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抗菌肽JH-3的抑菌活性及其稳定性分析
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摘要
抗菌肽JH-3是根据牛血红蛋白源抗菌肽P3的氨基酸序列进行分子改造后的抗菌多肽,有18个氨基酸残基,经抗菌肽数据库APD预测,相对分子量为2091.51 U,正电荷量为+3,总疏水率为50%。为了检测抗菌肽JH-3的抑菌活性和稳定性,通过人工方法合成了抗菌肽JH-3,通过微量稀释法检测了抗菌肽JH-3对2株革兰阳性菌、4株革兰阴性菌和1株真菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),通过扫描电镜观察了细菌和真菌形态的变化,测定了抗菌肽JH-3的溶血性、热稳定性、酸碱稳定性和盐稳定性。结果表明,抗菌肽JH-3对革兰阳性菌(金黄色葡萄球菌和猪链球菌2型)的MIC在6.25-25μg/mL之间,对革兰阴性菌(大肠杆菌、猪霍乱沙门菌、副猪嗜血杆菌和猪胸膜肺炎放线杆菌)的MIC在3.125-50μg/mL之间,对真菌(白色念珠菌)的MIC为12.5μg/mL,均具有良好的抗菌活性。经抗菌肽JH-3处理后,大肠杆菌细胞表面出现皱缩、孔洞;金黄色葡萄球菌出现菌体皱缩,细胞的完整性受到破坏;白色念珠菌细胞膜表面出现凹陷、突出、裂痕。在6-100倍MIC时,312.5μg/mL抗菌肽JH-3的溶血率仅为12.84%;75-100℃的高温、80-100mM的高浓度NaCl和pH 4.0及pH 10.0的高酸碱性对抗菌肽JH-3的抑菌活性没有明显的影响。研究结果为抗菌肽JH-3的临床应用提供了理论基础,且抗菌肽JH-3有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力。
引文

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