南方水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白P6是病毒增殖的关键因子

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• 论文作者：韩玉 ; 贾东升 ; 毛倩卓 ; 陈倩 ; 陈红燕 ; 魏太云
• 年：2016
• 作者机构：福建农林大学植物病毒研究所福建省植物病毒学重点实验室;
• 论文关键词：南方水稻黑条矮缩病毒 ; 白背飞虱 ; 病毒原质 ; 复制 ; 关键因子
• 会议召开时间：2016-08-05
• 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
• 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
• 语种：中文
• 分类号：S435.11
• 学会代码：ZGVS
• 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
• 会议地点：中国江苏南京
• 主办单位：中国植物病理学会
• 学会名称：中国植物病理学会
• 页数：1
• 文件大小：55k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)引起的南方水稻黑条矮缩病给我国农业生产造成巨大的损失。SRBSDV编码的非结构蛋白P5-1、P6和P9-1是病毒侵染形成病毒原质(viroplasm)的组分,参与病毒的复制和装配。本实验通过首先免疫荧光标记技术在介体培养细胞中观察SRBSDV侵染后P5-1、P6和P9-1表达的先后顺序,结果发现P6在SRBSDV侵染白背飞虱细胞时最早表达并不断增大,随后P5-1和P9-1蛋白表达。随后利用RNAi技术分别干扰P5-1、P6和P9-1蛋白在白背飞虱培养细胞中的表达,均导致SRBSDV的侵染率显著降低。抑制P5-1蛋白表达后,P5-1和P9-1的表达量明显降低,但P6的表达量和对照组相当;抑制P6蛋白表达后,P5-1、P6和P9-1的表达量都显著降低;抑制P9-1蛋白表达后,除了自身蛋白的表达量降低外,另外两个蛋白的表达水平不受影响。为了进一步验证P6蛋白的功能,通过微针注射法将源于P6、P5-1和P9-1基因的dsRNA分别导入饲毒1 d的白背飞虱体内,以dsGFP处理为对照,注射后5 d后对白背飞虱消化道进行免疫荧光标记。共聚焦显微镜观察发现,与对照组相比,分别抑制病毒原质三个组分蛋白的表达均可阻碍病毒在昆虫体内的增殖,且病毒被局限在初侵染的上皮细胞内。其中dsP6处理组带毒率显著下降,且P6蛋白被抑制后P5-1和P9-1蛋白均不表达;而抑制P5-1或P9-1蛋白的表达后,昆虫的带毒率不受影响,且在初侵染上皮细胞内仍可观察到P6蛋白的表达。该研究结果表明P6蛋白是病毒原质形成中的关键因子,最早表达并参与激发或调控病毒原质其他组分蛋白的表达,抑制P6蛋白的表达则完全阻碍病毒的增殖。该研究结果同时表明P6蛋白是阻断病毒增殖最理想的靶标。

引文