稻曲病菌T-DNA插入突变体B1812侧翼基因克隆
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- 论文作者：薄惠文 ; 俞咪娜 ; 王亚会 ; 于俊杰 ; 尹小乐 ; 丁慧 ; 周俞辛 ; 齐中强 ; 杜艳 ; 宋天巧 ; 张荣胜 ; 刘永锋
- 年：2016
- 作者机构：江苏省农业科学院植物保护研究所;南京农业大学生命科学学院;
- 论文关键词：稻曲病菌 ; T-DNA ; 致病力 ; 基因克隆
- 会议召开时间：2016-08-05
- 会议录名称：中国植物病理学会2016年学术年会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of the Annual Meeting of Chinese Society for Plant Pathology(2016)
- 语种：中文
- 分类号：S435.111.4
- 学会代码：ZGVS
- 会议名称：中国植物病理学会2016年学术年会
- 会议地点：中国江苏南京
- 主办单位：中国植物病理学会
- 学会名称：中国植物病理学会
- 页数：1
- 文件大小：57k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
水稻稻曲病是发生在水稻穗部的一种真菌病害,由病原菌稻曲病菌(Ustilagrnoidea virens)侵染引起。近年来,随着水稻杂交品种的大面积推广、农田氮肥施用量增加等因素,水稻稻曲病在我国各稻区已从次要病害逐渐成为主要病害。稻曲病菌的发生对水稻产量和质量均有严重影响,危害我国粮食安全。本研究室利用农杆菌介导的转化技术构建了稻曲病菌P1的TDNA插入突变体库,并通过田间接种筛选致病力变化突变体。本研究对筛选得到一株致病力减弱突变体B1812进行研究,观察并分析了突变体B1812的菌落形态、菌落直径、孢子形态、产孢能力等生物学特性,克隆了致病相关基因,并初步探究了该基因的功能。通过生物学性状研究发现,突变体B1812在固体培养基PSA和TB3上的菌落形态和生长速率与P1相比无显著差异,而在MM培养基上的生长速率下降。突变体液体摇培后产生的分生孢子大小明显小于P1,且其产孢能力也显著下降。Southern杂交表明,T-DNA在B1812的基因组中为单拷贝插入。利用HiTail-PCR和RACE-PCR,克隆了T-DNA插入位点全长为2 196bp的侧翼基因UvHac1,T-DNA插入在基因的5′UTR区。荧光定量PCR结果显示,基因的表达量显著下降。侧翼基因UvHac1含有一个高度保守的bZIP结构域,与真菌转录激活因子Hac1同源,且与UV-8b菌株中的UV8b_1075同源。Hac1p是一种在真菌的非折叠蛋白响应(UPR)中起关键作用的转录因子,UPR是真核生物进化中保守的一种机制。稻曲病菌中Hac1p的调控功能目前正在进一步研究,本研究为解析稻曲病菌中转录因子Hac1的功能,及其在致病过程中的作用提供了研究基础。
引文