胶体金免疫层析试纸条检测香束顶病毒方法的建立
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摘要
是热带和亚热带地区重要的经济作物,在世界水果贸易和消费中占有极其重要的位置,中国是世界第三大香生产国。而香束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)引致的香束顶病毒病是世界香产业生产中的主要限制因子之一,目前还没有切实有效的防控方法,其中种植无病种苗是当前防控该病的主要措施之一,而无病种苗的生产有耐于快速、高效和简便的检测方法。本研究在免疫渗透技术的基础上,以胶体金作为示踪标记物、硝酸纤维膜为介质,通过毛细管作用使样品溶液在介质上运动,待测物同层析材料上的受体发生特异性亲和反应。通过探索香束顶病毒单克隆抗体及AP标记羊抗鼠IgG最佳浓度和探针制备的最适胶体金pH值及抗体浓度等条件,建立了胶体金免疫层析试纸条技术,并对该技术的特异性、灵敏度、稳定性和重复性效果等进行了评价。结果表明,探针制备的最适胶体金pH值为6.0,BBTV抗体与胶体结合的最佳浓度为12μg/mL,所建立的胶体金免疫层析试纸条法仅对携带BBTV的香样品才呈阳性反应。这表明所建立的BBTV胶体金免疫层析试纸条法可以快速、有效、方便、可靠的检测香植株是否带有BBTV病毒。本研究对于香束顶病毒病的防治具有重要的意义。
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