摘要
仔猪早期断奶导致肠道黏膜脱落,绒毛萎缩,隐窝加深,肠道屏障功能障碍,严重的诱发腹泻甚至死亡,给养殖业造成大量经济损失。本文旨在研究仔猪断奶应激过程中肠道细胞周期调控因子的变化规律,解析断奶过程中肠道细胞周期机制,为改善仔猪断奶应激提供理论依据。试验选取12窝杜×长×大新生仔猪,随机分成两组,每组6窝,每窝1个重复。对照组仔猪全程哺乳,断奶组仔猪21日龄断奶。在仔猪20日龄、22日龄(1天)、25日龄(4天)和28日龄(7天)时每窝选取1头仔猪采集血样和肠道组织,测定血清抗氧化指标、肠组织H_2O_2和NO含量、肠道细胞周期蛋白mRNA表达和蛋白水平。结果表明:仔猪断奶4天血清中H_2O_2含量和MDA显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px酶活力和抑制羟自由基能力显著降低(P<0.05);断奶1、7天空肠NO水平和断奶1、4、7天空肠H_2O_2含量显著提高(P<0.05);断奶仔猪肠道cyclinD和cyclinE的mRNA表达和蛋白水平无显著的变化(P>0.05);断奶4天仔猪肠道细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子p21(P>0.05)和p27(P<0.05)mRNA表达上调,断奶4、7天仔猪肠道p21和1、4、7天p27蛋白表达显著提高(P<0.05);断奶4天肠道组织smad4 mRNA表达和蛋白水平显著下降(P<0.05),而断奶7天smad4蛋白水平显著增加(P<0.05)。结果表明,断奶应激诱发仔猪产生过量的ROS,一方面,ROS上调了p21、p27的表达;另一方面,ROS通过抑制smad4的表达上调了p21和p27,p21和p27通过抑制Cyclin-CDK复合物的活性,阻止细胞进程,致使肠道细胞周期阻滞,细胞增殖抑制、绒毛萎缩,隐窝增生,肠道功能障碍。推测肠道细胞周期阻滞发生在G1期。
引文