NOX4与TGF-β对A549细胞迁移的影响

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• 论文作者：薛腾 ; 徐小艳 ; 夏艳秋 ; 任亚南 ; 燕贞 ; 姚武 ; 周舫
• 年：2016
• 作者机构：郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室;
• 会议召开时间：2016-11-16
• 会议录名称：第六届中国毒理学会免疫毒理专业委员会换届及学术会议资料汇编
• 语种：中文
• 分类号：R114
• 学会代码：ZGDV
• 会议名称：第六届中国毒理学会免疫毒理专业委员会换届及学术会议
• 会议地点：中国河南开封
• 主办单位：中国毒理学会免疫毒理专业委员会
• 学会名称：中国毒理学会
• 页数：2
• 文件大小：161k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

目的:探讨NOX4与TGF-β对A549细胞迁移的影响,以及TGF-β对A549细胞EMT进程的影响,进一步探讨TGF-β诱导A549细胞的EMT进程与细胞迁移的关系。方法:实验共分为五组:TGF-β组,空白对照组,DPI组,TGF-β+DPI组,DMSO组。划痕实验检测A549细胞迁移能力,RT-PCR检测各组NOX4mRNA水平,流式细胞仪检测各组ROS表达,Western blot检测各组NOX4、snail、E-cadherin蛋白表达量。结果:结果显示,DPI与DMSO组比较,TGF-β组与TGF-β+DPI组比较可以表明使用NOX4的抑制剂DPI可以有效抑制NOX4的表达(P<0.05)。使用TGF-β刺激A549细胞后,TGF-β组与DMSO组比较,TGF-β可以增加NOX4的表达。使用TGF-β刺激A549细胞,并且使用NOX4的抑制剂DPI对A549细胞预处理,检测EMT相关蛋白的表达:TGF-β组与DMSO组比较,snail蛋白表达上升,E-cadherin蛋白表达下降;DPI组与DMSO组比较,TGF-β+DPI组与TGF-β组比较,snail蛋白表达下降,E-cadherin蛋白表达上升。这些EMT相关蛋白的改变以及流式细胞仪结果表明使用TGF-β刺激A549细胞后,NOX4的表达升高,ROS产量升高,细胞发生EMT进程。使用DPI后,NOX4被显著抑制,ROS的产量降低,细胞的EMT进程被抑制。划痕实验:TGF-β组与DMSO组比较,DPI组和空白对照组比较,TGF-β+DPI组与TGF-β组比较,划痕愈合率均降低,表明TGF-β可以增加A549细胞的迁移能力,并且DPI可以抑制FGF-β诱导A549细胞的迁移。细胞形态学:TGF-β组与空白组比较,细胞变得细长,成细长的梭形状;DPI组与DMSO组比较,TGF-β十DPI与TGF-β组比较,使用DPI后,细胞变圆变顿。综上所述,结果为:TGF-β可以使A549细胞中NOX4的表达升高,ROS产量增加,间质样细胞标志蛋白snail蛋白表达升高,上皮样细胞标志蛋白E-cadherin蛋白表达降低,细胞形态变得细长,成细长的梭形状,细胞发生EMT进程,并且发生EMT进程细胞获得更大的迁移能力。使用NOX4的抑制剂DPI后,A549细胞中的NOX4表达降低,ROS的产量降低,间质样细胞标志蛋白snail蛋白表达降低,上皮样细胞标志蛋白E-cadherin蛋白表达升高,细胞变圆变顿,可以抑制由TGF-β诱导EMT-进程,并且A549细胞的迁移能力在使用DPI后显著降低。结论:TGF-β刺激A549细胞后,细胞内NOX4表达升高,ROS产量增加,A549细胞发生EMT进程,细胞迁移能力增强。DPI抑制NOX4的表达后,ROS产量降低,A549细胞的EMT进程被抑制,进而TGF-β诱导的A549迁移被抑制。综上所述,TGF-β诱导的A549细胞迁移和细胞发生的EMT进程有关。

引文