摘要
目的探讨肠道病毒71型(EV71)的复制与宿主细胞RLR信号通路的相互关系,为治疗EV71感染提供新的策略。方法 Ficoll-Hypaque分离人外周血单个核细胞,重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、重组人白细胞介素-4(IL-4)诱导培养成树突状细胞(DCs)并检测其表型;PCR array技术检测EV71感染DCs前后不同时间RLR信号通路相关分子的mRNA的表达变化;并用Western Blot检测该信号通路关键分子及EV71/VP1水平。采用Luminex液相芯片技术检测IL-6、IL-2、MCP-1等细胞因子表达水平。结果 PCR array显示EV71感染DCs 8小时可引起IκB-α、IKK-β、IL-1α、IL-12、JUN、Fos、NF-KB1等基因表达明显上调,而MAP2K1、MAP2K2、MAPK1和MAPK3的表达未见明显变化。EV71感染8小时可引起c-Jun、c-fos和NF-κB磷酸化水平增高,而ERK1/2呈现双相激活趋势。MEK1/2特异性的抑制剂U0126可显著地降低受染细胞中EV71 VP1的蛋白水平,抑制MEK/ERK信号通路关键分子的蛋白磷酸化水平。EV71感染可以促进DCs分泌IL-2、MCP-1等细胞因子;U0126作用DCs后,细胞因子IL-6、IL-2和MCP-1的产生明显降低。结论EV71感染可引起MEK/ERK信号通路的活化,对EV71的复制具有重要作用。
引文