PD-L1单抗的制备及其在抗肿瘤免疫应答中的作用

详细信息    查看官网全文

• 论文作者：冯沛然 ; 黄建芳 ; 向军俭 ; 郝代玲 ; 王敏珍
• 年：2016
• 作者机构：暨南大学抗体工程研究中心广东省分子免疫与抗体工程重点实验室;
• 论文关键词：PD-L1 ; 单克隆抗体 ; 免疫检验点 ; 免疫治疗
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R730.51
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：1
• 文件大小：1347k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

目的:制备PD-L1的m Ab并应用于肿瘤检测与抑瘤研究。方法:应用杂交瘤细胞技术制备PD-L1的m Ab并用腹水方式产生大量PD-L1 m Ab;用Western-blot方法检验制备的PD-L1 m Ab与人肿瘤细胞裂解液中的PD-L1结合、间接荧光标记方法通过流式细胞仪分析制备的PD-L1 m Ab与人肿瘤细胞膜表面的PD-L1结合、肿瘤免疫组化方法鉴定PD-L1 m Ab;通过用表达PD-1的T细胞细胞对不同程度表达PD-L1蛋白的肿瘤进行杀伤,并与加入PD-L1抗体,检测其T细胞毒性、肿瘤细胞凋亡情况、细胞因子表达变化,研究PD-L1抗体是否能增强T细胞的杀伤活性。结果:共制备出4株高亲和力、高特异性的抗人PD-L1 m Ab,腹水效价2×106。Western-blot结果显示制备的抗PD-L1 m Ab能与人肿瘤细胞裂解液中PD-L1蛋白特异性结合。间接免疫荧光标记人肿瘤细胞流式分析证实制备的单克隆抗体能特异结合人肿瘤细胞的膜蛋白PD-L1。免疫组化结果显示该抗体在免疫病理组织中有高度特异性,在1mg/ml的抗体浓度中稀释50000倍后仍与病理组织有很强的反应性。结论:间接荧光标记PD-L1 m Ab与肿瘤细胞膜表面PD-L1特异性识别提示制备的抗体可应用于流式分析中表型测定的荧光抗体;PD-L1 m Ab与乳腺癌免疫病理组织的高度特异性反应将提示该抗体可应用于免疫病理组织的检测,与其他肿瘤组织芯片的反应试验正在进行;初步的细胞实验证明该抗体有一定的促进T细胞对肿瘤细胞的杀伤,进一步的研究是T细胞联合PD-L1单抗的体内抑瘤效果。

引文