家蚕核型多角体病毒IE1的多克隆抗体制备及鉴定
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- 论文作者：董战旗 ; 张军 ; 胡楠 ; 鲁成 ; 潘敏慧
- 年：2016
- 作者机构：西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室;西南大学农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点实验室;
- 论文关键词：家蚕 ; 家蚕核型多角体病毒 ; IE1 ; 原核表达 ; 多克隆抗体
- 会议召开时间：2016-07-01
- 会议录名称：第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会论文集（摘要汇编）
- 语种：中文
- 分类号：S884.51
- 学会代码：ZGCU
- 会议名称：第十二届家（柞）蚕遗传育种暨良种繁育学术研讨会
- 会议地点：中国重庆
- 主办单位：中国蚕学会、国家蚕桑产业技术体系
- 学会名称：中国蚕学会
- 页数：1
- 文件大小：660k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
家蚕核型多角体病毒(BmNPV)ie1基因是BmNPV DNA复制的必需基因,其编码的IE1蛋白能够反式转录激活杆状病毒早期基因的表达。为了进一步研究IE1蛋白在家蚕核型多角体病毒感染宿主过程中具体的功能,研究通过PCR扩增BmNPV ie1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET32,获得重组质粒pET32-IE1,经测序正确后,转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达菌株。通过IPTG诱导融合蛋白原核表达后,初步纯化收集抗原,免疫新西兰大白兔,制备IE1多克隆抗体。应用制备的免疫兔血清进行Western-blot分析,结果显示多克隆抗体能特异识别BmN-PV的IE1和IE0蛋白。免疫荧光结果同样显示IE1蛋白定位于宿主细胞核病毒复制中心。IE1抗体制备的成功为进一步研究IE1在病毒感染家蚕中的作用机理奠定了基础。
引文