TNFα特异结合循环microRNA-146a的生物学功能研究
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摘要
Micro RNA是具有转录后调控功能的小分子非编码RNA,参与多种生理、病理过程。近年研究显示,体液中存在着大量游离于细胞之外的micro RNA,称为"循环micro RNA",可作为疾病诊断、病情监测、预后判定的生物学标志物。不仅如此,循环micro RNA可作为细胞通讯的新型介质。我们利用RNA免疫共沉淀法(RIP),从激活的U937细胞裂解物、细胞培养上清中钓取TNF-α结合的micro RNA,q RT-PCR结果显示,TNF-α与miR-146a特异结合。进而,我们利用凝胶阻滞实验(EMSA)与冷竞争实验检测TNF-α与miR-146a之间的相互作用,结果显示miR-146a能与rh TNF-α直接特异结合,且呈剂量依赖关系;冷探针能够竞争miR-146a与TNF-α的结合。micro RNA转运实验结果显示,rh TNF-α能够特异地促进miR-146a转运至靶细胞。相关研究还在进行中。本研究将有助于阐释循环micro RNA介导细胞通讯的分子机制与生物学意义;有望揭示TNFα作为一种新型载体蛋白运输循环miR-146a的生物学功能研究。
引文

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