猪DFAT细胞成脂再分化过程中KLF2和PPARγ的表达模式

详细信息    查看官网全文

• 论文作者：高霞 ; 李方正 ; 郇延军 ; 刘志敏 ; 李秀 ; 姜忠玲 ; 牛德勋 ; 宋学雄
• 年：2016
• 作者机构：青岛农业大学动物科技学院;
• 论文关键词：猪 ; 成熟脂肪细胞 ; 去分化 ; 再分化 ; KLF2 ; PPARγ
• 会议召开时间：2016-08-20
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S828
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会
• 会议地点：中国河南郑州
• 主办单位：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：2
• 文件大小：112k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

探讨猪去分化脂肪细胞(DFAT)再分化过程中Krppel样因子2(KLF2)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达模式,为揭示猪DFAT细胞再分化机制奠定基础。(方法)用猪成熟脂肪细胞,经"天花板"培养法获得DFAT细胞,用流式细胞仪检测表面抗原,用形态学和油红O染色提取法检测成脂分化程度,用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测KLF2和PPARγmRNA的表达。(结果)猪成熟脂肪细胞接种第3d,可见明显的去分化迹象,即细胞形成犄角状突起,大脂滴分解成小脂滴并向细胞外排出脂滴,随去分化时间增加,细胞内脂滴含量逐渐减少,接种至第9d脂滴基本排出完毕,接种至第12d成纤维样原代DFAT细胞长满底壁,将此DFAT细胞传代培养至第20代,细胞生长良好;间充质干细胞表面抗原CD29、CD44和CD105的阳性表达率分别达到99.0%、97.8%和99.5%,而造血干细胞表面抗原CD45和CD34的表达仅为3.55%和4.55%;将F3代细胞成脂诱导3d,梭型细胞变宽变短,胞质中出现脂滴,并随诱导时间增加,脂滴数量增多和体积增大,诱导至12d诱导率达80%以上;成脂诱导2、5、10和15d时,KLF2的相对表达量分别为0.47、0.35、0.31和0.11,PPARγ的相对表达量分别为1.62、2.03、3.22和3.49。(结论)本研究成功获得了高纯度的DFAT细胞,具有间充质干细胞性质和成脂再分化能力;KLF2的表达在成脂分化过程中随诱导时间的增加而减少,而PPARγ的表达量随诱导时间的延长逐步增加,表明KLF2在DFAT细胞的成脂再分化过程中可能起到抑制作用,而PPARγ可能会发挥促进作用。

引文