摘要
目的 :观察盐酸小檗碱协同Toll样受体激动剂,对体内外γδT的促进作用。方法 :Balb/c雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、盐酸小檗碱高、低剂量组、甲氨蝶呤组。小鼠外用咪喹莫特制备模型,运用银屑病皮损面积和疾病严重程度评分标准观察小鼠模型皮损变化情况,于给药第8天取材,光镜下观察皮损组织形态学变化、测量表皮层厚度;免疫组织化学法检测增殖细胞核抗原反映表皮角质形成细胞增殖程度;检测皮损中CD3,反映皮损T淋巴细胞浸润程度,免疫荧光法检测involucrin反映表皮分化情况;检测脾脏、腹股沟浅表淋巴结重量及CD3+、CD4+、CD8+细胞比例,CBA法检测小鼠血清中炎症相关因子含量;RT-PCR和Western Blot方法检测皮损中炎症相关细胞因子和相关蛋白的表达。分选小鼠脾脏γδT细胞,流式细胞术检测盐酸小檗碱在γδT细胞上对Toll样受体激动剂的影响。结果 :盐酸小檗碱组小鼠皮损加重,皮损中CD3+细胞数量明显高于模型组(P<0.01)。小鼠皮肤中IL-17Am RNA、IL-22m RNA、IL-17Cm RNA、RORγt m RNA、CCR6m RNA、CCL20 m RNA相对表达水平均低于模型组小鼠(P<0.05)。体外盐酸小檗碱各组细胞增殖明显增加,IFN-γ的分泌细胞表型增高,IL-17的分泌表型显著减低。结论 :盐酸小檗碱可协同Toll样受体7、8的激动剂,调节γδT细胞的活性和功能,抑制该细胞的IL-17相关的促炎作用。
引文