抗菌肽Lcn2调节中性粒细胞功能在银屑病发病中的作用及机制
详细信息 查看官网全文
摘要
目的:研究抗菌肽Lcn2在银屑病患者皮损的表达及其作用。方法:RT-PCR、Western blot、组织免疫荧光等检测银屑病患者皮损、咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损以及健康人皮肤组织中Lcn2的表达情况;利用咪喹莫特小鼠模型,检测在体中和Lcn2蛋白或注射Lcn2重组蛋白后,银屑病样炎症浸润的情况;采用RT-PCR、免疫荧光、ELISA、Western blot、siRNA转染等方法研究Lcn2促进中性粒细胞分泌重要炎症因子及其相关受体、信号通路活化的情况;Transwell实验检测Lcn2对中性粒细胞的趋化功能;Western blot等确认银屑病患者皮损处高表达的Lcn2的细胞来源。结果:与正常对照相比,Lcn2在银屑病患者及咪喹莫特诱导小鼠的表皮和真皮均明显高表达;高表达的Lcn2主要来自于活化的角质形成细胞和中性粒细胞的分泌;动物体内实验发现,中和Lcn2后,咪喹莫特小鼠银屑病样炎症减轻,反之,在注射重组蛋白Lcn2组,小鼠银屑病样炎症加重,且Lcn2的高低水平明显影响中性粒细胞的浸润程度;银屑病患者外周血中性粒细胞高表达Lcn2特异性受体24p3R;而Lcn2可以通过激活Erk1/2和p38 MAPK信号通路促进中性粒细胞产生IL-6、IL-8、IL-1α、TNF-α四种重要的细胞因子;siRNA抑制d HL-60类中性粒细胞24p3R表达后,重组蛋白Lcn2刺激d HL60细胞不能激活Erk1/2和p38 MAPK信号通路,且四种细胞因子的分泌受到抑制;Transwell实验结果表明,Lcn2可以趋化中性粒细胞,且此趋化依赖浓度梯度及Erk1/2和p38 MAPK信号通路激活。结论:银屑病角质形成细胞及中性粒细胞高表达的Lcn2,后者通过趋化中性粒细胞,并激活Erk1/2和p38 MAPK信号通路,促进中性粒细胞产生多种银屑病相关细胞因子,参与银屑病发病。
引文