HBV转基因小鼠和HBV感染者肝脏内促炎性CD205+巨噬细胞的初步鉴定
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摘要
目的:本文通过对比检测HBV转基因小鼠肝脏中CD205~+巨噬细胞和CD205-巨噬细胞,旨在明确CD205~+巨噬细胞的来源、表型和功能,为以巨噬细胞为靶标治疗慢性乙型肝炎提供新的方案。方法:利用流式细胞术检测CD205~+巨噬细胞在HBV转基因小鼠肝脏中活化分子的表达;利用流式细胞仪分选HBV转基因小鼠肝脏中CD205~+巨噬细胞和CD205-巨噬细胞,并通过定量PCR研究CD205~+巨噬细胞和CD205-巨噬细胞炎性细胞因子、趋化因子、趋化因子受体、吞噬相关基因mRNA表达水平;利用ELISA检测HBV转基因小鼠和B6野生型小鼠肝脏中巨噬细胞体外经CpG和E.coli DNA刺激后炎性细胞因子的分泌水平。结果:相比于B6野生型小鼠,HBV转基因小鼠肝脏中CD205~+巨噬细胞比例明显增高且处于活化状态,且其表达高水平Ly6C、CD11b分子,提示CD205~+巨噬细胞是来自外周的炎性巨噬细胞;在HBV转基因小鼠肝脏中,CD205~+巨噬细胞许多基因表达量较CD205-巨噬细胞上调,比如细胞因子Tnfα、Il6、Il10和Il12,趋化因子Cxcl2、Ccl2、Ccl3、Ccl4和Ccl24,趋化因子受体Cd74,吞噬相关的基因Cd5l、Macro、Gpnmb、Trem2和Axl等,也有一些趋化因子受体处于下调状态,比如Ccr2和Cx3cr1;经CpG和E.coli DNA体外刺激后,HBV转基因小鼠肝脏中巨噬细胞炎性细胞因子的分泌量较B6野生型小鼠增多,比如IL-6,IL-10,IL-12p40和TNF-α;在HBV感染者体内,外周血中CD205~+单核细胞比例较正常人群增高,肝脏中CD205~+巨噬细胞的比例也较正常人群增高。结论:在HBV转基因小鼠和HBV感染者体内,CD205~+单核/巨噬细胞比例显著增高,且具有促进炎症的功能,靶向干涉这群细胞,对慢性乙型肝炎的治疗具有重大意义。
引文