猪呼吸道疾病综合征的猪肺中支气管败血波氏杆菌的分离、鉴定及特性分析
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摘要
猪呼吸道疾病综合征(Porcine Respiratory Disease Complex,PRDC),为猪呼吸道疾病的总称,临床上多表现为多种病原微生物的共感染,由于其发病率高、病症复杂以及防治难度大,现已成为规模化养猪场的主要难题。支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)是一种革兰氏阴性菌,作为一种条件致病菌在家畜中如猪、兔、犬、牛、羊等广泛存在。虽在大多数的情况下表现为带菌不发病,但有时会导致呼吸道感染包括家畜和人。在猪群中,该细菌或和产毒毒杀巴氏杆菌共感染是导致猪萎缩性鼻炎的主要病因。另外,该细菌与其它病原包括猪繁殖与呼吸综合征、副猪嗜血杆菌、或猪链球菌等病原共感染是导致PRDC的主要原因。尽管目前的研究显示猪支气管败血波氏杆菌参与诱导PRDC,但是,其在PRDC中的作用还不十分清楚。为了研究Bb在PRDC中的作用,本研究对确定为PRDC的猪肺中Bb进行了分离、鉴定以及特性分析包括毒力因子的鉴定以及耐药性分析。根据临床症状、组织病理切片、病原微生物鉴定分析,自2014年6月-2015年1月,从22头送检的病猪中,鉴定出PRDC病猪15头。根据16S r RNA基因序列分析的结果,从5头有PRDC的猪肺中分离鉴定出Bb。随后,对Bb相关毒力因子包括皮肤坏死毒素(DNT)、百日咳杆菌粘附素(PRN)以及鞭毛蛋白B(fla B)进行PCR鉴定,结果发现所有分离株上述毒力因子都为阳性。最后,对Bb分离株进行药敏实验,我们选17种抗生素,发现所有分离株对安普霉素、复方新诺明、强力霉素、头孢曲松高度以及替米考星高度耐药,而对红霉素、阿莫西林\克拉维酸、嗯喏沙星、庆大霉素、卡那霉素、四环素高度敏感;此外,部分菌株对环丙沙星、氟苯尼考、多西环素以及阿米卡星耐药。综上所述,本研究从PRDC猪肺中分离到支气管败血波氏杆菌,这些分离株显示出不同的耐药特性,同时,含有与毒力相关的毒力因子。这些结果暗示了Bb的潜在的致病特性,将来的研究:一方面对这些分离株进行基因组层面的分析比较与其它分离株的遗传进化的关系;另一方面,借助小鼠模型,将对这些分离在致病性进行分析。这些结果为揭示Bb的致病机制以及在PRDC中的作用具有重要的作用。
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