结肠小袋纤毛虫纯种克隆与扩增培养
详细信息 查看官网全文
- 论文作者：闫文朝 ; 王天奇 ; 薛瑞 ; 宋少甫
- 年：2016
- 作者机构：河南科技大学动物科技学院动物检疫实验室;
- 论文关键词：结肠小袋纤毛虫 ; 体外培养 ; 改进型DMEM培养基 ; 有限稀释法 ; 纯种克隆群
- 会议召开时间：2016-08-08
- 会议录名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会论文摘要集
- 英文会议录名称：The Abstracts of the Tenth Symposium for Yong Scientists of China Society of Parasitology
- 语种：中文
- 分类号：S852.724
- 学会代码：JISC
- 会议名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会第十届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会
- 会议地点：中国四川成都
- 主办单位：中国动物学会寄生虫学专业青年委员会
- 学会名称：中国动物学会寄生虫学专业委员会
- 页数：1
- 文件大小：603k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
结肠小袋纤毛虫病(Balantidiasis,简称小袋虫病)是一种水源性人兽共患原虫病,呈世界性分布,主要引起宿主腹泻,结肠溃疡和穿孔,也可引起人泌尿生殖道、肺部和肝脏等肠道外感染。本研究从腹泻断奶仔猪的盲肠内容物中分离小袋虫孟津株MJ6滋养体,用改进型DMEM培养基于28℃恒温培养箱培养至虫体数量增长高峰期。然后用有限稀释法对数量增长高峰期滋养体进行梯度克隆培养,再进行扩增培养,最后加入青/链霉素进行抑菌培养。多次重复试验结果显示,用改进型DMEM培养基(20%小牛血清+12 mg/m L淀粉,p H=7.2)能成功培养部分稀释梯度的小袋虫滋养体扩增到大量虫体。成功克隆扩增的下限是250个滋养体,低于250个滋养体的克隆虽然出现短暂的滋养体生长,最终均不能获得大量滋养体。添加双抗后,培养体系中的杂菌数量明显减少。本研究最终获得了250个滋养体的准纯种克隆群体,为何低于250个滋养体的克隆不能成功获得更高纯度的克隆群?其原因有待探究。本研究成功获得小袋虫准纯种克隆群体,为该虫的基因组学和转录组学研究奠定重要基础。
引文