HIF-1α对小鼠骨骼肌Nrf2转录活性的影响
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摘要
研究目的:低氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF-1)是机体的氧感受器,在机体缺氧的条件下起中心调节作用。核因子E2相关因子2(Nff2)是机体氧化还原平衡的主要调节因子。本研究试图通过诱导型HIF-1α转基因鼠,探讨HIF-1α对小鼠骨骼肌Nff2转录活性的影响。研究方法:C57BL/6J小鼠和HIF-1α转基因小鼠各10只。脱颈处死后取两侧骨骼肌。酶联免疫法(ELISA)测定骨骼肌细胞核中的Nrf2-ARE结合活性。Western Blot法测定骨骼肌HIF-1α、Nff2、超氧化物歧化酶1(SOD1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、过氧化氢酶(CAT)、醌氧化还原酶(NQO-1)等的蛋白表达量。实时荧光定量PCR测SOD1、SOD2、CAT、NQO-1等基因的mRNA表达水平。高质荧光测定法检测小鼠骨骼肌ROS水平。研究结果:(1)HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nff2胞浆蛋白表达量显著高于野生鼠(P<0.05);(2)HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nff2结合活性显著高于野生鼠(P<0.05);(3)HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nrf2靶基因SOD1(P<0.05)、SOD2(P<0.05)、NQO-1(P<0.01)mRNA相对表达量显著高于野生鼠;(4)HIF-1α转基因鼠骨骼肌抗氧化蛋白SOD2(P<0.05)、NQO-1(P<0.01)表达量显著高于野生鼠;(5)HIF-1α转基因鼠骨骼肌ROS水平明显低于野生鼠(P<0.05)。研究结论:HIF-1α转基因鼠骨骼肌Nff2转录活性增强,抗氧化蛋白表达增加,骨骼肌ROS含量下降。提示,适当的HIF-1α表达可以提高小鼠骨骼肌的抗氧化能力。
引文

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