非洲鸵鸟BAFF蛋白的原核表达与纯化
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- 论文作者：杨克礼 ; 宋卉 ; 刘华珍 ; 彭克美 ; 肖珂 ; 黄海波 ; 孙鹏鹏 ; 王静
- 年：2016
- 作者机构：华中农业大学动物医学院;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;
- 论文关键词：非洲鸵鸟 ; BAFF ; 原核表达 ; 纯化
- 会议召开时间：2016-08-20
- 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会论文集
- 语种：中文
- 分类号：S839
- 学会代码：ZGXJ
- 会议名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会
- 会议地点：中国河南郑州
- 主办单位：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会
- 学会名称：中国畜牧兽医学会
- 页数：1
- 文件大小：67k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
B细胞刺激因子(B cell activating factor,BAFF)是肿瘤坏死因子家族中的主要成员之一,是具有维持B细胞功能稳定作用的重要细胞因子。BAFF可使尚未完全成熟的B细胞分化成更加成熟的B细胞,延长B细胞的存活、促进抗体的产生,BAFF因其在B细胞发育及自身免疫病中起非常重要的作用而日益受人关注和重视。本研究根据前期克隆获得的非洲鸵鸟BAFF基因序列设计特异性引物,分别在上、下游引物中加入EcoR I和HindⅢ酶切位点,成功扩增出非洲鸵鸟BAFF基因后,将该基因片段克隆至pET-28a原核表达载体;PCR、酶切鉴定结果表明成功构建了阳性重组表达质粒pET-OsBAFF。将该重组质粒转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达,将表达产物进行SDS-PAGE电泳分析、Western blotting验证,最终确定该重组蛋白大小为32.2 kD。该蛋白生物学活性好、纯度高,为探讨非洲鸵鸟BAFF作为B淋巴细胞生长促进剂和免疫增强剂等潜在用途奠定了基础。
引文