驯鹿Ghrelin基因克隆及其在各器官内的表达定位研究

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• 论文作者：张曼 ; 金鑫 ; 刘骄 ; 杨银凤
• 年：2016
• 作者机构：内蒙古农业大学兽医学院;
• 论文关键词：Ghrelin ; 驯鹿 ; 基因组DNA ; 反转录-聚合酶链式反应 ; 实时荧光定量PCR ; 免疫组织化学
• 会议召开时间：2016-08-20
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S825
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会
• 会议地点：中国河南郑州
• 主办单位：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：2
• 文件大小：122k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

Ghrelin主要是由胃产生的一种肽,具有刺激生长激素(growth hormone,GH)释放、促进食物的吸收和胃排空以及调节能量平衡、保护和促进愈合等多种生理功能。驯鹿是一种半野生动物,目前有关Ghrelin在驯鹿体内的作用还尚不明确。本研究为了得到驯鹿Ghrelin基因组DNA的全序列,以及了解Ghrelin在驯鹿各器官内的表达和定位情况,通过采用克隆技术、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术、免疫组织化学等多种生物学技术进行研究。结果显示:驯鹿Ghrelin基因组DNA共4076 bp,由4个外显子和3个内含子组成。RT-PCR和RT-qPCR结果显示:在驯鹿的下丘脑、垂体、舌、食管、瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、心、肺、肝、脾、肾、膀胱、输尿管、睾丸、附睾、输精管、淋巴结、甲状腺、胰、肾上腺、胸腺、精囊腺、骨骼肌等器官内Ghrelin均有表达,且在皱胃内的表达量最高,其次是胰、十二指肠、睾丸和食管,与下丘脑、垂体和舌等其余器官内的表达量相比较高。免疫组织化学结果揭示:Ghrelin的免疫阳性细胞在食管和皱胃内主要定位于黏膜层、黏膜下层和肌层;在瘤胃、网胃、瓣胃的黏膜层、黏膜下层中也可见Ghrelin的免疫阳性细胞,但肌层中未见表达;在肠道Ghrelin的免疫阳性细胞主要位于十二指肠、空肠、回肠、结肠的黏膜层、黏膜下层和肌层,尤其在肠绒毛和黏膜下层分布较多;在肝、胰、甲状腺、垂体前叶、睾丸、肺、肾、脾器官内均有Ghrelin的免疫阳性细胞。本研究首次成功克隆出驯鹿Ghrelin基因组DNA的全序列,填补了野生反刍动物Ghrelin的空白,同时丰富了反刍动物生物学资料。表达和定位结果表明Ghrelin在驯鹿各器官普遍分布,充分说明其具有广泛的生理作用,对人工饲养驯鹿具有重要的意义。

引文