新城疫病毒通过巨胞饮作用入侵细胞的研究

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• 论文作者：张玉嫱 ; 谭磊 ; 丁铲
• 年：2016
• 作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所;
• 会议召开时间：2016-07-20
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S852.65
• 学会代码：SYGW
• 会议名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会
• 会议地点：中国内蒙古通辽
• 主办单位：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
• 页数：2
• 文件大小：471k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(NDV)引起禽的一种急性、热性、高度接触性传染病,会导致呼吸道、消化道、胃肠道和中枢神经系统的损伤。作为一种依赖细胞生存的病毒,NDV的感染谱比较广泛,不但能够感染禽类细胞,比如CEF,DF1,而且对多种人类肿瘤细胞如He La细胞,A549细胞等也十分易感,但是目前为止对于NDV的入侵途径尚未完全阐明。已经有报道指出,NDV可以分别通过网格蛋白(Clathrin)和小窝蛋白(Caveolae)介导的两种内吞途径侵入细胞。但是,病毒可能通过更多方式入侵宿主细胞,比如巨胞饮作用(Macropinocytosis),受体介导的内吞,吞噬作用等等。已经有研究表明,病毒可以利用巨胞饮途径作为直接入侵宿主的方式,比如腺病毒,艾滋病病毒,流感病毒,埃博拉病毒等等。巨胞饮作用是细胞在某些因素刺激下,细胞膜皱褶形成大且不规则的原始内吞小泡,非选择性地内吞细胞外营养物质和液相大分子的过程。肌动蛋白的细胞骨架已被证明能够参与不同内吞作用的调节。巨胞饮体的形成同样需要在膜皱褶部分发生肌动蛋白的聚合,这一过程可以被细胞松弛素D有效的抑制,同时细胞膜上Na+/H+交换导致胞内酸化,也是巨胞饮形成的重要因素之一,因此,利用5-(N-乙基-N-异丙基)阿米洛利(EIPA)是检测巨胞饮产生与否的重要检测方法。除此之外,巨胞饮的产生还受PKC激酶调控,Rottlerin能够有效抑制PKC激酶的活化。本实验选择5-(N-乙基-N-异丙基)阿米洛利(EIPA),细胞松弛素D(Ctyo D),卡马拉素Rottlerin这三种药物对NDV感染He La的内吞作用进行研究,为全面、系统地阐明NDV感染细胞途径提供实验依据。方法:药物预处理细胞后,按1MOI的剂量病毒感染细胞,3h,6h,12h收样,Western Blot检测药物对病毒入侵的影响。结论:EIPA,Ctyo D,Rottlerin均能有效的抑制病毒的进入,并出现药物剂量的依赖性,因此说明NDV能够通过巨胞饮作用进入细胞。该结果将有助于进一步研究NDV的感染机理。

引文