肥大细胞TLR4与SR对口蹄疫病毒样颗粒的模式识别与应答效应
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摘要
口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)感染偶蹄动物所引起的急性触性传染病,目前尚无有效的防治措施。病毒样颗粒(VLP)不含病毒核酸,其抗原主要被MHC-I类分子提呈。肥大细胞不仅在炎症反应和抗病毒感染中发挥重要做用,而且在适应性免疫应答过程中发挥启动与调节作用,但目前对肥大细胞在抗FMDV感染中的作用仍不清楚。为研究肥大细胞TLR4与SR对VLP的识别作用,先用TLR4和SR抑制剂分别处理的腹腔肥大细胞(PMC),然后分别用本室制备的VLP、HBc Ag和VP1-VP4蛋白负载上述PMC,分别在6h,12 h,24h和48h收集PMC上清液,用ELISA检测PMC上清中TNF-α、IL-6、IL-10含量,结果发现,抑制TLR4的PMC负载VLP,在四个时间点中只有48h的PMC上清中TNF-α含量极显著低于对照组(p<0.001),这个变化与抑制TLR4的PMC负载VP1-VP4的上清中含量的变化趋势是一致的,在1h的上清中只有IL-6含量极显著高于对照组(p<0.001),在6h的PMC上清中只有IL-10含量显著高于对照组(p<0.001),在6h和24h的PMC上清中只有IL-10含量显著低于对照组(p<0.05),在48h的上清中IL-6和IL-10含量极显著低于对照组(p<0.001)。其中,抑制TLR4负载HBc Ag的上清中所检测的三种细胞因子的含量变化趋势与负载VLP的均相同。这表明在48h之前PMC识别VLP后所分泌的TNF-α不是由TLR4介导的。VLP被PMC识别后,在不同的时间点TLR4介导IL-6和IL-10的分泌亦或是抑制其分泌。抑制SR的PMC负载VLP,在1h的PMC上清中只有TNF-α和IL-6含量极显著高于对照组(p<0.001),在6h的PMC上清中IL-10含量极显著低于对照组(p<0.001),但是在24h的上清中TNF-α、IL-6和IL-10含量与对照组相比较无统计学意义,在48h的上清中只有TNF-α和IL-6含量极显著低于对照组(p<0.001)。这表明,在PMC识别VLP后的,可以引起PMC分泌TNF-α和IL-6。这表明,PMC识别VLP所发生的脱颗粒主要是由SR介导的,TLR4主要介导TNF-α和IL-10的分泌,PMC分泌TNF-α和IL-6是由SR介导。
引文

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