MiR-451a通过调节巨噬细胞游走抑制因子(MIF)增强乳腺癌他莫昔芬敏感性研究

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• 论文作者：刘振茹 ; 冯婷 ; 朱婷婷 ; 吴啟虹 ; 周黎明 ; 李虹
• 年：2014
• 作者机构：四川大学华西第二医院妇儿疾病及出生缺陷教育部重点实验室;四川大学华西基础医学与法医学院药理学教研室;
• 论文关键词：慢病毒载体 ; MiR-451a ; 乳腺癌 ; 他莫昔芬 ; 巨噬细胞游走抑制因子
• 会议召开时间：2014-09-13
• 会议录名称：纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛论文汇编
• 语种：中文
• 分类号：R737.9
• 学会代码：WSWZ
• 会议名称：纪念中国微生物学会临床微生物学专业委员会成立五周年-第五届中国临床微生物学大会暨台湾海峡两岸微生物学与免疫学论坛
• 会议地点：中国浙江宁波
• 主办单位：中国微生物学会临床微生物学专业委员会、医学参考报社、宁波大学医学院附属医院
• 学会名称：中国微生物学会临床微生物学专业委员会
• 页数：1
• 文件大小：44k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

目的探讨miR-451a对乳腺癌细胞增殖及他莫昔芬敏感性的调控作用。方法构建重组慢病毒表达载体pHBLV-miR-451a及pHBLV-miR-451a sponge,利用脂质体法将重组慢病毒载体及辅助包装原件质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,浓缩后测定病毒滴度;将包装好的重组慢病毒感染乳腺癌细胞MGF-7和LCC2,荧光显微镜观察转染效率;建立miR-451a过表达及抑制表达的稳定细胞株,Real-Time PCR检测miR-45 1a及巨噬细胞游走抑制因子(MIF)mRNA表达水平;Westernblot检测MIF的蛋白水平;MTT比色法测定细胞增殖能力;克隆形成实验测定细胞克隆形成能力;Transwell侵袭实验测定细胞的侵袭能力。结果成功构建慢病毒载体Lv-miR-451a和Lv-miR-451a sponge,病毒滴度测定为1×108 CFtU/ml,利用puromycin筛选获得稳定表达Lv-miR-451a及Lv-miR-451a sponge的细胞株;过表达miR-451a(Lv-miR-451.a)可显著下调MIF mRNA及蛋白表达水平,从而抑制细胞增殖,克隆形成及侵袭能力,恢复他莫昔芬的敏感性;下调miR-451a(Lv-miR-451a sponge)则可促进细胞增殖,克隆形成及侵袭能力增强,对他莫昔芬的耐药性增强。结论 miR-451a/MIF信号通路对乳腺癌细胞的生物学特性发挥调控作用,是临床治疗乳腺癌的潜在靶点。

引文