Kisspeptin对热应激SD大鼠引起的心肌肥厚的影响
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摘要
为了研究kisspeptin对热应激造成的心肌肥厚和心脏功能的影响及其分子机制。将实验动物32只SD雄性大鼠随机分为4组(分别为:对照组、热应激组、kisspeptin组和kisspeptin+热应激组),每组8只。诱导发生热应激后采用基于GC/TOF-MS技术对肝脏代谢物的变化进行分析;采用HE染色、masson染色方法和透射电镜病理检测观察心脏组织病理变化;采用基因芯片技术检测心脏基因组变化,并用RT-PCR检测与心肌肥厚相关具体基因ITGB8、ITGA4、BNP(脑钠肽)mRNA在转录水平的变化,并用Western-Blot在蛋白水平验证其表达量的变化。1、在代谢水平:通过主成分分析(PCA)发现热应激组(H)与对照组(C)代谢物相比发生分离,kisspeptin+热应激组(KH)与对照组(C)相比出现回归的趋势;2、在表观水平:采用HE染色、Masson染色和透射电镜的方法,我们发现热应激组(H)与对照组(C)相比出现心肌损伤现象(心肌纤维波浪状收缩,心肌细胞直径变大,纤维增多,线粒体肿胀、空泡,线粒体嵴断裂等),但是kisspeptin+热应激组(KH)与热应激组(H)相比,心肌纤维排列整齐,心肌细胞直径减小,纤维减少,线粒体空泡和线粒体嵴断裂现象明显减少并趋于正常对照组(C);3、在分子水平:基因芯片检测结果表明,一共出现1112个基因发生变化,其中330个基因发生上调,782个基因发生下调,在变化的基因中,我们通过KEGG和GO分析检测到3个与心肌肥厚通路相关的基因ITGB8、ITGA4和BNP在热应激组(H)发生上调,而kisspeptin+热应激组(KH)与热应激组(H)相比发生显著下调并趋于正常组(C);4、基因和蛋白结果进一步证明ITGB8和ITGA4在基因和蛋白质表达变化方面呈正相关。结果表明:本研究从形态学、代谢组学和分子机制方面证明kisspeptin一定程度上可以有效缓解由热应激所致的心肌肥厚和损伤,并为进一步研究kisspeptin在心肌上的作用机制提供了理论基础。
引文

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