抗原ELISA检测试剂盒和胶体金试纸条用于禽白血病病毒检测时的比较
详细信息    查看官网全文
摘要
为比较不同禽白血病病毒(ALV)抗原ELISA检测试剂盒和胶体金试纸条的灵敏度,本研究将A、B、J三种不同ALV亚群分别以50TCID50、100TCID50、500TCID50三种剂量接种培养于DF1细胞上,接种后第2-8天每天收取上清,每份上清用三种不同的抗原ELISA检测试剂盒(A、B、C)和两种胶体金试纸条(D、E)同时检测。结果显示,三种亚群三种剂量分别应用A、B、C三种ELISA检测试剂盒灵敏度基本一致,但在针对三种亚群的个别剂量时B试剂盒灵敏度略高于A和C;两种胶体金试纸条检测结果完全一致,但其灵敏度均比ELISA试剂盒低,检出时间延后1-2天。同时应用ELISA试剂盒A、B和胶体金试纸条D、E对60枚种蛋蛋清进行了检测,结果显示胶体金试纸条检出率远低于ELISA试剂盒检出率,在某些应用方面还无法完全替代ELISA检测试剂盒。不管是哪种胶体金检测试纸条的灵敏度均与所有的ALV抗原ELISA检测试剂盒存在一定差距,这种差距主要体现在对一些病毒含量较低情况时的判定,这容易使很多在临界值范围的样品被判断为阴性从而造成漏检,而这种缺陷可能会在一些低剂量感染诸如疫苗中外源病毒检测中将会体现出更大差别。在胶体金检测试纸条推出后,人们非常有兴趣知道操作更为简便的胶体金检测试纸条检测是否可以替代ALV抗原ELISA检测来更方便的完成评估,从本研究的结果看,在现有的条件下这种方法存在着一定的风险,即造成一定比例的假阴性从而引起漏检。考虑到我国不同地方品系鸡遗传背景的多样性和复杂性,特别是在p27表达水平与病毒感染率关系之间尚不完全清晰的情况下更要慎重使用。本研究应用不同ELISA试剂盒和胶体金试纸条对不同亚群不同接种剂量进行了比较,这将有助于广大试剂盒用户评价不同试剂盒和不同胶体金试纸条的特异性和灵敏度并确定不同方法应该在何阶段发挥其应有的作用。本研究为广大种鸡场开展禽白血病净化选择灵敏度高操作简便的检测方法及其适用范围提供了借鉴。
引文
[1]Cui Z,Du Y,Zhang Z,et al.Comparison of Chinese field strains of avian leukosis subgroup J viruses with prototype strain HPRS-103 and United States strains[J].Avian Diseases,2003,47:1321-1330.
    [2]Gao Y,Yun B,Qin L,et al.Molecular epidemiology of avian leukosis virus subgroup J in layer flocks in China[J].Journal Of Clinical Microbiology,2012,50:953-960.
    [3]Lai H,Zhang H,Ning Z,et al.Isolation and characterization of emerging subgroup J avian leukosis virus associated with hemangioma in egg-type chickens[J].Veterinary Microbiology,2011,151(3-4):275-283.
    [4]Xu B,Dong W,Yu C,et al.Occurrence of avian leukosis virus subgroup J in commercial layer flocks in China[J].Avian Pathology,2004,33(1):13-17.
    [5]Sun S H,Cui Z Z.Epidemiological and pathological studies of subgroup J avian leukosis virus infectious in chinese local yellow chicken[J].Avian Pathology,2007,36(3):221-226.
    [6]朱美真,吴玉宝,崔治中.山东地方品系鸡中一株ALV-A的分离鉴定[J].中国动物传染病学报,2009,17(4):31-35.
    [7]赵冬敏,张青婵,崔治中.芦花鸡中B亚群禽白血病病毒的分离与鉴定[J].病毒学报,2010,26(1):53-57.
    [8]Spencer JL,Gilka F,Gavora J S,et al.Distribution of lymphoid leukosis virus and p27 group-specific antigen in tissues from laying hens[J].Avian Diseases,1984,28(2):358-373.
    [9]叶建强,秦爱建,邵红霞,等.J亚群禽白血病病毒(ALV-J)ELISA检测方法的建立[J].中国兽医学报,2006,26(3):235-237.
    [10]张立成,关云涛,陈洪岩,等.应用RT-PCR技术检测禽白血病病毒及其在不同组织中检出结果的比较[J].中国实验动物学杂志,2002,12(5):303-304.
    [11]Zhang Q C,Zhao D M,Guo H J,et al.Isolation and identification of a subgroup A avian leukosis virus from imported meat-type grand-parent chickens[J].Virol Sin,2010,25(2):130-136.
    [12]张纪元,崔治中,丁家波,等.J亚群白血病病毒NX0101株感染性克隆化病毒的构建及其致病性[J].微生物学报,2005,45(3):437-440.
    [13]Dong Xuan,Liu Juan,Li Deqing,et al.Comparison of IFA and ELISA in the detection of Avain leukosis virus subgroup J in DF-1 cell cultures[J].Inter J Vet Sci,2012,1(1):13-15.
    [14]郭慧君,李中明,李宏梅,等.3种ELISA试剂盒检测不同亚型外源性鸡白血病病毒的比较[J].畜牧兽医学报,2010,41(03):310-314.
    [15]孟凡峰,范建华,徐步,等.J亚群禽白血病病毒TCID50不同测定方法的比较[J].中国兽医杂志,2015,9:31.
    [16]孟凡峰,范建华,徐步,等.核酸杂交技术在禽白血病病毒TCID50测定中的应用[J].中国家禽,2015,37(1):13-16.
    [17]朱瑞良,路建彪,王允超,等.用免疫胶体金试纸膜快速检测IBDV的研究[J].中国预防兽医学报,2003,25(3):227-231.
    [18]崔尚金,姜建宏,周艳君,等.猪繁殖与呼吸综合征胶体金抗体检测技术的建立和初步应用[J].中国预防兽医学报,2005,27(3):213-217.
    [19]房超,张泉,易海华,等.检测犬瘟热病毒的单克隆抗体胶体金试纸条的制备[J].中国动物传染病学报,2011,19(2):26-30.
    [20]孟盟,曹池,陈汉忠,等.水牛伊氏锥虫病免疫胶体金试纸条的研制及初步应用[J].畜牧兽医学报,2014,42(7):988-993.
    [21]Crittenden L B,Smith E J.A comparision of test materia1 for differentiating avian leukosis virus group-specific antigens of exogenous and endogenous origin[J].Avian Diseases,1984,28(4):l057-1071.
    [22]赵鹏,崔治中,马诚太.种蛋中禽白血病病毒p27抗原检出率与鸡群禽白血病发病率的相关性研究[J].畜牧兽医学报,2012,43(10):1618-1622.

© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号

地址:北京市海淀区学院路29号 邮编:100083

电话:办公室:(+86 10)66554848;文献借阅、咨询服务、科技查新:66554700