CD45RB~+DCs对T细胞功能影响的体外实验研究
详细信息    查看官网全文
摘要
目的 :通过体外DCs细胞和T淋巴细胞的共培养,分别检测不同DCs细胞对T淋巴细胞增殖能力和T淋巴细胞亚群的影响。方法:用Wistar大鼠的DCs和SD大鼠的CD4+T细胞进行共培养,包括以下几组。A组:con组为阴性对照组,即SD大鼠的CD4+T细胞,B组:con A为阳性控制组,即SD大鼠分选后的CD4+T细胞给予con A刺激(浓度10ng/ml),C组:在con A阳性控制组的基础上,加入Wistar大鼠未成熟DCs进行细胞共培养(DC:T=1:10),D组:在con A阳性控制组的基础上,加入Wistar大鼠CD45RB+DCs进行细胞共培养(DC:T=1:10),E组:在con A阳性控制组的基础上,加入Wistar大鼠成熟DCs进行细胞共培养(DC:T=1:10)。共培养72h后,取各组CD4+T细胞进行功能检测,包括以CCK-8法测定T淋巴细胞的扩增情况;初始Th细胞向Th1、Th2、Th17、Treg的分化;测定相应的转录因子T-bet、GATA-3、RORγt、Foxp3的表达。流式细胞检测各组CD4+Foxp3+T细胞数量。流式CBA法检测培养上清中的IL-2、l L-4、IL-10、l L-17A、l FN-γ、TNF-α和l L-6表达水平。结果 :细胞共培养后,CD45RB+DCs组T细胞增殖能力明显下降;同时CD45RB+DCs组CD4+Foxp3+T细胞的数量增加;CD45RB+DCs组和im DCs组特异性转录因子FOXP3和T-bet表达上升,GATA-3和R0Rγ表达下降,l L-2和l FN-γ水平降低,l L-4、l L-10以及TGF-β1水平升高,与对照组间存在明显差别(P<0.05)。结论 :大鼠CD45RB+DCs在体外明显抑制反应性T淋巴细胞的增殖,促进初始Th0细胞向Th2的方向分化倾斜,并能提升调节性T细胞的比例,进而增强T细胞的免疫抑制能力。
引文

© 2004-2018 中国地质图书馆版权所有 京ICP备05064691号 京公网安备11010802017129号

地址:北京市海淀区学院路29号 邮编:100083

电话:办公室:(+86 10)66554848;文献借阅、咨询服务、科技查新:66554700