沉香中苯乙基色酮衍生物GYF-21对LPS诱导BV2细胞产生炎症反应的抑制作用及分子机制研究

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• 论文作者：郭冉
• 年：2016
• 作者机构：北京中医药大学;
• 论文关键词：GYF-21 ; 小胶质细胞 ; 神经炎症 ; STAT1/3 ; NF-κB
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R285
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：2
• 文件大小：1336k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

目的:在化合物的前期抗炎活性筛选中,发现沉香中苯乙基色酮衍生物GYF-21具有很强的抑制LPS刺激小鼠小胶质细胞BV2产生NO的作用,可能具有较强的抗神经炎症作用,本研究对GYF-21抑制LPS诱导BV2细胞产生炎症反应的药效和作用机制进行系统研究,以寻找治疗以神经炎症为主要病理基础的神经疾病的药物先导化合物。方法:将处于对数生长期的BV2细胞接种到96孔板或6孔板中,利用系列浓度GYF-21处理BV2细胞1h后,加入LPS刺激BV2细胞。在LPS刺激24h后,利用Griess试剂检测96孔板中GYF-21对BV2细胞产生NO的抑制率。在LPS刺激6h后,收集6孔板中BV2细胞,提取mRNA,并进行逆转录和实时定量PCR检测i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β和MIP-1α的基因转录水平。在LPS刺激12h后,利用ELISA检测96孔板中BV2细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β和MIP-1α的释放量。在LPS刺激30min和3h后,利用Western blot检测NF-κB、MAPK和STAT1/3等炎症相关信号通路的活化情况。结果:GYF-21以剂量依赖性抑制LPS刺激BV2细胞产生NO,其抑制作用的IC50为2.1±0.02μM。RTPCR结果显示GYF-21在2.5μM以上浓度能够显著抑制i NOS、TNF-α、IL-6、IL-1β和MIP-1α的基因转录。ELISA结果显示GYF-21能够显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β和MIP-1α的分泌。Western blot结果显示GYF-21对STAT1/3的磷酸化以及I-κB、p65的过度活化都有显著的抑制作用。结论:GYF-21能够通过抑制STAT1/3和NF-κB信号通路发挥显著的抗炎作用,具有治疗以神经炎症为主要病理基础的神经疾病的重大潜力。

引文