长爪沙鼠TLR4基因片段克隆与脏器分布特征分析

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• 论文作者：朱乐欣 ; 蒋小武 ; 刘月环 ; 罗廉佳 ; 吴旧生
• 年：2016
• 作者机构：浙江大学动物科学学院;浙江省医学科学院;
• 论文关键词：长爪沙鼠 ; Toll样受体 ; 4基因(TLR4) ; 克隆 ; 组织分布
• 会议召开时间：2016-08-20
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S865.1
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会
• 会议地点：中国河南郑州
• 主办单位：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：1
• 文件大小：66k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

Toll样受体(Toll-1ike receptors,TLRs)是参与调节先天免疫的一类具有高度保守性的蛋白受体。为克隆长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)TLR4基因片段,分析其在内脏组织中的分布特征,本研究通过分析比较大鼠(Rattus norvegicus)、小鼠(Mus musculus)与仓鼠(Mesocricetus auratus)TLR4基因序列,选择保守区设计引物,扩增长爪沙鼠TLR4基因片段;将所得片段连接到克隆载体上,测序并使用DNASTAR Meglign软件分析该序列与其他不同种属动物TLR4基因序列同源性;采用半定量PCR与免疫组织化学技术分析TLR4在正常沙鼠脏器组织中的表达情况。结果显示,本研究成功克隆了长爪沙鼠TLR4基因片段(GenBank登录号:KX137123),BLAST分析比对发现,与其他鼠类的TLR4基因同源性在87.4%以上,与仓鼠的同源性较高(89.1%),与人(Homo sapiens)、猪(Sus scrofa)的TLR4司源性较低,分别为69.5%和73.1%,提示长爪沙鼠与仓鼠的亲缘关系较近,与人和猪的亲缘关系较远。半定量PCR分析结果显示,TLR4基因在沙鼠心、肝、脾、肺和肾中呈差异表达,以肺脏中表达量最高,肝脏中表达量最低。免疫组化结果表明,在长爪沙鼠的肺脏和脾脏组织中可见较多TLR4阳性反应产物,在肺脏中阳性反应产物主要见于肺泡支气管上皮细胞;在脾脏中阳性反应产物主要见于脾小结周围的边缘区,淋巴小结内也可见少量分布;肾脏中偶见阳性反应产物分布,心脏和肝脏上均未检出,这与转录水平结果较一致。研究结果为探宄长爪沙鼠先天免疫及其作为良好的动物感染模型提供了理论依据。

引文