基于脏腑体用论的重症肌无力症治规律及实验研究
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摘要
重症肌无力是乙酰胆碱受体抗体介导的、细胞免疫依赖及补体参与的一种神经-肌肉接头(neuro-muscular junction, NMJ)处传递障碍的自身免疫性疾病,病变主要累及NMJ突触后膜上乙酰胆碱受体,而临床表现为活动后加重、休息后减轻的、晨轻暮重的骨胳肌无力。病变主要累及NMJ突触后膜上乙酰胆碱受体(acytylcholinereceptor, AchR)。临床表现为活动后加重、休息后减轻、晨轻暮重的骨胳肌无力。全身肌肉均可受累,以眼肌为主,呼吸肌受累则出现肌无力危象,甚至危及生命。
重症肌无力属于中医“痿证”范畴,我国古代文献对痿证的认识渊源流长。根据其临床表现不同,分属不同的中医病症,如眼睑无力或下垂,属“睑废”或“睑垂”；复视属“视歧”；吞咽困难、饮水咳呛、言语无力、发音不清等则属“喑痱”；抬头无力属“头倾”；四肢瘫软无力属“痿症”范畴；肌无力危象则属“大气下陷”,而总的多以痿证论之。
痿证病因病机学的发展经历了秦汉时期的理论奠基、唐宋时期的继承整理、金元明清时期的全面发展,历代医家从多角度论述了痿证病因病机的复杂性、临床表现的多样性。当代中医结合各自临床实践经验,对重症肌无力的病因病机进行了不懈地探索,形成了各家争鸣的现象,主要包括从脏腑论、气血津液论、奇经络脉论等几个方面。到目前为止,对于重症肌无力病因病机的认识还处于探索阶段,尚未形成统一定论,而在临床实践中通过辨证论治配合专方专药、针灸治疗等方法,中医药治疗重症肌无力方面取得了肯定的疗效。
体用论始自哲学史上的本体论范畴,与中医学结合发生在明清,体用论中谈及的形质与功能主要与阴阳结合但又比阴阳具体,用在重症肌无力的症治研究上,可以从不同的理论角度,执体用说明脏腑病机、探究病症特点和药物功效。
本研究着重从能反映病机的最细小单元—症状、药物入手,通过建立数据库,为重症肌无力的研究建立一个平台,采用数理分析与数据挖掘技术,探寻症-证、药-症、药-药以及不同类别间的症状及用药特点,以核心方药推测基本病机,揭示重症肌无力的症治规律,并通过实验研究来验证并发现一些有价值、有意义的信息和内容。
[研究目的]
应用脏腑体用论、通过数理分析方法和数据挖掘技术阐释分析重症肌无力病例的症治规律。同时通过实验研究找出重症肌无力患者中特异性表达的miRNA组合,初步探讨中医证型与miRNA表达谱的相关性,从差异性基因表达方面来证实先天体不足存在的形态学依据,
[研究方法]
1.根据重症肌无力西医诊断标准、纳入标准、排除标准,确定纳入病例,共收集病例866例。
2.制定重症肌无力疾病的中医四诊信息采集表,收集重症肌无力患者的临床信息资料,填写调查问卷表：建立重症肌无力患者信息数据库,对数据进行预处理。
3.采用SAS8.0和SPSS19.0统计软件,通过因子分析、典型相关分析、关联规则分析、链接图、聚类分析等方法对相关数据进行统计学分析,对病例从诱因、发病节气、症状(兼夹症、合并症)、体征、舌象、脉象、中药等多个方面进行分析；对中医文献中有关重症肌无力中医药治疗用药情况进行分析。
4.运用中医脏腑体用论结合气机升降理论,对MG症治规律中的生理功能、病症变化规律、中药治疗特点进行理论分析。
5.运用miRNA芯片方法,分析正常人与重症肌无力患者TH1/TH2细胞亚型miRNA表达谱的差别,找出有差异的miRNA组合,再用实时荧光定量RT-PCR方法进行验证。
[研究内容]
1.理论内容分析
我们将五脏的体(空间形态结构)与用(升降出入的气化过程)相结合,在五脏相关学说的基础上从体用角度去进一步认识重症肌无力,用以阐述藏象关系、病机、病症规律和用药特点,并进一步指导调治脏腑。可以说体用学说不仅有其理论探讨的价值,亦有其临床实践的意义。
简单讲,体即形质,用即功能。体既包括脏腑本身、所藏之气血精液及其所络属之形体、官窍等。用,是从其功能所主、阴阳属性尤其是气血运化等方面而言的。脏为阴,体阴而用阳,腑为阳,体阳而用阴。五脏六腑之体,有五脏六腑之用,体用一源,不能截然分开。
从脏腑体用论的角度来看,重症肌无力以脾胃虚损、脾气虚弱为主要病机,“虚损”即包含“体”不足,脾气虚弱即是“用”不及的体现。因虚致损,虚损并见,体用失调。脾主肌肉,眼睑、上下肢肌肉、颈部肌肉、咀嚼肌等均为脾体之所属,脾体不足有先天禀赋之因,亦有脾用不及之由。脾用不及在重症肌无力上主要表现为运化不足、升清无力；脾气不用,气血无生化之源,经脉失养则四肢肌无力、神疲乏力；脾不运化水湿,则现口水多、苔白苔腻之湿邪内阻之象；脾不升清、升举乏力则出现脾用不及之眼睑下垂等诸症。脾用不及、脾胃虚弱是重症肌无力发病的核心病机之一,体用失调、五脏升降失司是重症肌无力的病机转归。
2.一般情况分析
2.1性别年龄分布情况：以女性发病率居高,发病年龄以中青年为主。
2.2发病诱因及加重因素：大部分发病无明显诱因；在诱发或加重因素中以受寒多见。
2.3西医分型：以西医ⅡB分型多见。
2.4合并疾病：重症肌无力多伴有胸腺和甲状腺的异常；在感染类疾病中以肺部感染多见；骨质疾病、各种囊肿也多发；常合并其他自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、红斑狼疮、带状疱疹等。
2.5发病与节气：总体发病从立夏到处暑以及冬至有小高峰出现。
3.重症肌无力总库病症特点及用药规律研究
3.1症状及舌脉情况
病例中出现症状共计78个,症状出现频次总计10070次,而常见症状(使用频次45以上)为48个,累计出现频次为9509次,占整个病例症状出现总频次的94.42%,核心症状较为集中。临床症状以上下肢肌无力、精神疲乏、上下眼睑下垂出现的频次较高。舌脉以舌淡、苔白腻、脉细出现频次最高,舌暗红、脉弦滑居后。
3.2辨证情况
通过总库的因子分析,从寒热辨证和虚实辨证来看,属虚证多,兼有热证。气血津液辨证以气虚证最为多见,其次为痰湿证、痰热证、瘀阻证。从脏腑辨证体系看,以脾系辨证使用频次最高,肺系、肾系其次,肝系、心系辨证频次居后。通过五脏聚类分析可以看出,脾气虚弱型最多见,多脏受累比较普遍。
3.3治法及用药情况
重症肌无力相关病例共使用药物165味,药物使用频次为12714味次,其中使用频数在40次以上、使用频率为4.6%以上的有52味中药,累计使用频次为10833味次,占药物使用频次的85.20%。
重症肌无力病例中使用的核心药物群为“黄芪、甘草、党参、当归、陈皮、柴胡、白术、五指毛桃、升麻、山萸肉、山药、薏仁、茯苓”。
根据因子分析结果,常用药物分为6类：补中益气、补肾益精、益胃生津、健脾祛湿、温阳益气、化痰散结。根据聚类分析结果,用药以补中益气升提为主,兼杂滋阴、清热、活血、化湿、祛痰、温阳等药物。清热药多质清味淡,少苦寒攻伐；温阳药物以温润为主,较少辛温燥热之品；气机药对的使用是一大特点。
3.4症-药关系分析
根据药物因子与症状因子之间的pearson相关分析结果,5个典型变量相关均有统计学意义。关联分析结果发现单一药物与单一症状间的关联关系不密切,但药物组合与症状群间有密切关联。
4.重症肌无力各分库病症特点及用药规律研究
4.1五脏分库
将总库中有关五脏系常见的48个症状对应心肝脾肺肾(系)进行逐一归类后进行统计分析。结果显示以脾系出现的症状最为多见,肺、肾次之,肝、心居后。
4.2五脏聚四类分库
对重症肌无力病例心肝脾肺肾五脏系中医四诊信息进行聚类分析,按照数据本身内在的规律得到聚四类的统计结果。聚类分析较为客观的反映了五脏动态关系的证型分布情况,建立聚四类分库,进行病症及用药规律的研究。
聚一类核心症状群是“左眼睑下垂、右眼睑下垂、上肢肌无力、下肢肌无力、神疲乏力”,聚二类核心症状群是“眠差、神疲乏力、吞咽困难、上肢肌无力、下肢肌无力、右眼睑下垂、左眼睑下垂”,聚三类核心症状群为“神疲乏力、吞咽困难、上肢肌无力、下肢肌无力、左眼睑下垂、右眼睑下垂”,聚四类核心症状群为“复视、眼球活动障碍、神疲乏力、上肢肌无力、下肢肌无力、左眼睑下垂、右眼睑下垂”。聚二、三、四类核心症状群中均含聚一类症状,但各自又有区别。
从链接图可以看出,聚四类分库中的核心药物群非常相近。
4.3中医文献分库
为了对比研究其它地区治疗重症肌无力的中医药治疗经验,在中国期刊全文数据库(CNKI)进行了重症肌无力相关文献的查询,去除重复发表、非核心期刊的文献,共检索出1985-2012年期间核心期刊发表的有关重症肌无力中医治疗文献176篇,进行数据统计和数据挖掘。
重症肌无力相关文献中使用的药物以补中益气汤、六味地黄汤加减为基本方,贯穿了补肾温阳、活血通络、化湿和营、益肾滋阴以及特色用药等治疗方法。其中核心药物群是“升麻、黄芪、甘草、党参、陈皮、柴胡、白术、当归”。
5.重症肌无力差异性表达基因miRNA的检测及验证
从现代医学还原论的视角来看,脏腑之“体”可以微观细化到基因表达方面,差异性表达基因miRNA的异常表达和调控与MG等自身免疫性疾病的发生发展密切相关。有关重症肌无力miRNA表达谱的文献数据非常有限。我们从MG总病例中严格筛选出符合纳入标准的病例作为研究对象,通过基因芯片检测技术并结合PCR方法,检测并验证重症肌无力患者中特异性表达的miRNA组合,初步探讨中医证型与miRNA表达谱的相关性,从实证的角度对MG存在先天体不足的形态学依据进行了论证。
[研究结论]
1.生理特点：脾胃为气机升降之枢轴,脾胃之气为五脏气化平衡的核心和动力。
2.病症规律：脾(胃)体不足、脾(胃)用不及、多脏受累、体用失调为主要病机；脾气不用、脾肾两虚兼湿邪中阻是基本矛盾,日久五脏不用、体用失调为病机转归。
3.用药特点：重症肌无力岭南用药特点以补益脾肾、升提中气、健脾化湿为主,地域特色用药突出,补阳不温燥,清热少苦寒；现代中医文献用药以补中益气为主,有补肾阳、益肾阴、化瘀血等不同治法。治疗用药上补用为主、补体助用、升降并用、体用同调。
4.实验研究：通过基因芯片结合PCR方法,对与重症肌无力发病密切相关的差异性表达基因miRNA进行了检测和验证,对反证先天体不足存在的形态学依据以及阐释中医药诊治重症肌无力的治疗靶点均有启示作用。
Myasthenia Gravis (MG) is an autoimmune disease, which acetylcholine receptor(AChR) antibody mediates, cell immunity depends on and addiment participates. It is presented clinically with being aggravating after activity and alleviative after the break.
There were not the records of myasthenia gravis in TCM documents. According to its primary symptom, myasthenia gravis is belonged to scope of flaccidity-syndrome in TCM usually. It has been found in ancient TCM literatures, treated as the several different terms.
The complexity of the pathogenesis and the diversity of clinical manifestations about the Flaccidity-syndrome in TCM had been discussed from various angles in ancient TCM literatures.
Theory of the Ontology and Function began with the theory of the philosophy category, combined with Chinese Medicine, which expounds pathogenesis and explores the clinical differentiation of Syndromes characters and the rules in drug usages from traditional Chinese medicine point of view.
Objective
Theory of the Ontology and Function of Viscera is adopted to discuss the characteristics and the rules in drug usages of Myasthenia Gravis by using the method of statistical analysis and date mining.
Methods
1. Collected886cases of patients according to diagnosis, inclusion and exclusion criteria of myasthenia gravis.
2. Designed clinical information collection questionnaire of myasthenia gravis, collected clinical information on patients with myasthenia gravis, filled out the questionnaire form.
3. established a database of myasthenia gravis disease, and preprocessed data.
4. Statistical analysis of Solar Terms, symptoms, frequently used traditional Chinese medicine and other variables by using various statistic methods with SPSS19.0and SAS8.0, combining the drug use in TCM literatures and the microarray results, the basic pathogenesis process and treatment regularity of the myasthenia gravis was explored by the TCM Ontology and Function theory of Viscera.
Results
1.theroy analysis
In brief, Ontology corresponds to body and Function is the same as action. Viscera distinguishes between Yin and Yang. Weakness of spleen and stomach is the main pathogenesis of Myasthenia Gravis. Based on it, Myasthenia gravis is usually recognized with ocular complaints or generalized muscle weakness, blepharoptosis may be an early and prominent sign of the disease. The viscera function will be in disorder, which appears on the imbalance of Yin and Yang over time.
2. general discussion
(1)Myasthenia Gravis incidence of women is higher than men, the middle-aged people and youth is morbility peak.
(2)This disease may have no apparent cause, cold for common factors.
(3)IIB type is the most common type in clinic.
(4)Myasthenia Gravis is often complicating with thymic abnormalities, and thyroid disease, pulmonary infection, rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus, and other autoimmune diseases.
(5) The time of onset of MG focuses primarily on the period from the beginning of Summer to the limit of heat as well as winter solstice.
3. Research on symptoms and medication regulation in overall database
(1)Common clinical symptoms of Myasthenia Gravis include:general fatigue, ptosis, accompanied by pale tongue with white greasy fur.
(2)Cumulative frequency statistics for the five organs of myasthenia gravis indicate the spleen is involved all along, followed by lung, kidney, liver, heart.
(3)Frequently traditional Chinese medicine include herbals of invigorating vital energy and spleen such as astragalus, licorice, wu zhao long, atractylodes, cimicifuga, bupleurum, tangerine peel, Chinese angelica, codonopsis, and herbals of invigorating kidney and warming yang such as cornus, eucommia, morinda officinal is, cistanche, polygonum mult iflorum, etc.The results indicate that morbility of myasthenia gravis is most closely with spleen and kidney.
(4)There is close relationship between drug combinations and symptoms group.
4. Research on symptoms and medication regulation in separate database
(1) Myasthenia Gravis is involved with spleen mainly, related with kidney, lungs closely, and also related with liver and heart secondly.
(2) The results of cluster analysis reflect the distribution of TCM syndromes of the viscera objectively.
(3) The principle of the drug use of TCM literature is given priority to the tonifying spleen and kidney.
5. The genes specifically expressed in MG are clear evidence of congenital deficiency about the Ontology.
Conclusion
1.The spleen and stomach is the central hub of the ascending and descending of functional activities of Qi, the soul and core of Vital energy of five-viscera.
2.Disorder in the Ontology and Function of spleen is the major pathogenesis of MG. As time goes on and several viscera diseases in succession or simultaneously.
3. The feature of clinical application for TCM is usually tonifying spleen and kidney based, meanwhile removing dampness to regulate spleen, balance the the Ontology and Function of Viscera
4. miRNAs are detected by Chip analysis and validated by PCR.
重症肌无力属于中医“痿证”范畴,我国古代文献对痿证的认识渊源流长。根据其临床表现不同,分属不同的中医病症,如眼睑无力或下垂,属“睑废”或“睑垂”；复视属“视歧”；吞咽困难、饮水咳呛、言语无力、发音不清等则属“喑痱”；抬头无力属“头倾”；四肢瘫软无力属“痿症”范畴；肌无力危象则属“大气下陷”,而总的多以痿证论之。
痿证病因病机学的发展经历了秦汉时期的理论奠基、唐宋时期的继承整理、金元明清时期的全面发展,历代医家从多角度论述了痿证病因病机的复杂性、临床表现的多样性。当代中医结合各自临床实践经验,对重症肌无力的病因病机进行了不懈地探索,形成了各家争鸣的现象,主要包括从脏腑论、气血津液论、奇经络脉论等几个方面。到目前为止,对于重症肌无力病因病机的认识还处于探索阶段,尚未形成统一定论,而在临床实践中通过辨证论治配合专方专药、针灸治疗等方法,中医药治疗重症肌无力方面取得了肯定的疗效。
体用论始自哲学史上的本体论范畴,与中医学结合发生在明清,体用论中谈及的形质与功能主要与阴阳结合但又比阴阳具体,用在重症肌无力的症治研究上,可以从不同的理论角度,执体用说明脏腑病机、探究病症特点和药物功效。
本研究着重从能反映病机的最细小单元—症状、药物入手,通过建立数据库,为重症肌无力的研究建立一个平台,采用数理分析与数据挖掘技术,探寻症-证、药-症、药-药以及不同类别间的症状及用药特点,以核心方药推测基本病机,揭示重症肌无力的症治规律,并通过实验研究来验证并发现一些有价值、有意义的信息和内容。
[研究目的]
应用脏腑体用论、通过数理分析方法和数据挖掘技术阐释分析重症肌无力病例的症治规律。同时通过实验研究找出重症肌无力患者中特异性表达的miRNA组合,初步探讨中医证型与miRNA表达谱的相关性,从差异性基因表达方面来证实先天体不足存在的形态学依据,
[研究方法]
1.根据重症肌无力西医诊断标准、纳入标准、排除标准,确定纳入病例,共收集病例866例。
2.制定重症肌无力疾病的中医四诊信息采集表,收集重症肌无力患者的临床信息资料,填写调查问卷表：建立重症肌无力患者信息数据库,对数据进行预处理。
3.采用SAS8.0和SPSS19.0统计软件,通过因子分析、典型相关分析、关联规则分析、链接图、聚类分析等方法对相关数据进行统计学分析,对病例从诱因、发病节气、症状(兼夹症、合并症)、体征、舌象、脉象、中药等多个方面进行分析；对中医文献中有关重症肌无力中医药治疗用药情况进行分析。
4.运用中医脏腑体用论结合气机升降理论,对MG症治规律中的生理功能、病症变化规律、中药治疗特点进行理论分析。
5.运用miRNA芯片方法,分析正常人与重症肌无力患者TH1/TH2细胞亚型miRNA表达谱的差别,找出有差异的miRNA组合,再用实时荧光定量RT-PCR方法进行验证。
[研究内容]
1.理论内容分析
我们将五脏的体(空间形态结构)与用(升降出入的气化过程)相结合,在五脏相关学说的基础上从体用角度去进一步认识重症肌无力,用以阐述藏象关系、病机、病症规律和用药特点,并进一步指导调治脏腑。可以说体用学说不仅有其理论探讨的价值,亦有其临床实践的意义。
简单讲,体即形质,用即功能。体既包括脏腑本身、所藏之气血精液及其所络属之形体、官窍等。用,是从其功能所主、阴阳属性尤其是气血运化等方面而言的。脏为阴,体阴而用阳,腑为阳,体阳而用阴。五脏六腑之体,有五脏六腑之用,体用一源,不能截然分开。
从脏腑体用论的角度来看,重症肌无力以脾胃虚损、脾气虚弱为主要病机,“虚损”即包含“体”不足,脾气虚弱即是“用”不及的体现。因虚致损,虚损并见,体用失调。脾主肌肉,眼睑、上下肢肌肉、颈部肌肉、咀嚼肌等均为脾体之所属,脾体不足有先天禀赋之因,亦有脾用不及之由。脾用不及在重症肌无力上主要表现为运化不足、升清无力；脾气不用,气血无生化之源,经脉失养则四肢肌无力、神疲乏力；脾不运化水湿,则现口水多、苔白苔腻之湿邪内阻之象；脾不升清、升举乏力则出现脾用不及之眼睑下垂等诸症。脾用不及、脾胃虚弱是重症肌无力发病的核心病机之一,体用失调、五脏升降失司是重症肌无力的病机转归。
2.一般情况分析
2.1性别年龄分布情况：以女性发病率居高,发病年龄以中青年为主。
2.2发病诱因及加重因素：大部分发病无明显诱因；在诱发或加重因素中以受寒多见。
2.3西医分型：以西医ⅡB分型多见。
2.4合并疾病：重症肌无力多伴有胸腺和甲状腺的异常；在感染类疾病中以肺部感染多见；骨质疾病、各种囊肿也多发；常合并其他自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、红斑狼疮、带状疱疹等。
2.5发病与节气：总体发病从立夏到处暑以及冬至有小高峰出现。
3.重症肌无力总库病症特点及用药规律研究
3.1症状及舌脉情况
病例中出现症状共计78个,症状出现频次总计10070次,而常见症状(使用频次45以上)为48个,累计出现频次为9509次,占整个病例症状出现总频次的94.42%,核心症状较为集中。临床症状以上下肢肌无力、精神疲乏、上下眼睑下垂出现的频次较高。舌脉以舌淡、苔白腻、脉细出现频次最高,舌暗红、脉弦滑居后。
3.2辨证情况
通过总库的因子分析,从寒热辨证和虚实辨证来看,属虚证多,兼有热证。气血津液辨证以气虚证最为多见,其次为痰湿证、痰热证、瘀阻证。从脏腑辨证体系看,以脾系辨证使用频次最高,肺系、肾系其次,肝系、心系辨证频次居后。通过五脏聚类分析可以看出,脾气虚弱型最多见,多脏受累比较普遍。
3.3治法及用药情况
重症肌无力相关病例共使用药物165味,药物使用频次为12714味次,其中使用频数在40次以上、使用频率为4.6%以上的有52味中药,累计使用频次为10833味次,占药物使用频次的85.20%。
重症肌无力病例中使用的核心药物群为“黄芪、甘草、党参、当归、陈皮、柴胡、白术、五指毛桃、升麻、山萸肉、山药、薏仁、茯苓”。
根据因子分析结果,常用药物分为6类：补中益气、补肾益精、益胃生津、健脾祛湿、温阳益气、化痰散结。根据聚类分析结果,用药以补中益气升提为主,兼杂滋阴、清热、活血、化湿、祛痰、温阳等药物。清热药多质清味淡,少苦寒攻伐；温阳药物以温润为主,较少辛温燥热之品；气机药对的使用是一大特点。
3.4症-药关系分析
根据药物因子与症状因子之间的pearson相关分析结果,5个典型变量相关均有统计学意义。关联分析结果发现单一药物与单一症状间的关联关系不密切,但药物组合与症状群间有密切关联。
4.重症肌无力各分库病症特点及用药规律研究
4.1五脏分库
将总库中有关五脏系常见的48个症状对应心肝脾肺肾(系)进行逐一归类后进行统计分析。结果显示以脾系出现的症状最为多见,肺、肾次之,肝、心居后。
4.2五脏聚四类分库
对重症肌无力病例心肝脾肺肾五脏系中医四诊信息进行聚类分析,按照数据本身内在的规律得到聚四类的统计结果。聚类分析较为客观的反映了五脏动态关系的证型分布情况,建立聚四类分库,进行病症及用药规律的研究。
聚一类核心症状群是“左眼睑下垂、右眼睑下垂、上肢肌无力、下肢肌无力、神疲乏力”,聚二类核心症状群是“眠差、神疲乏力、吞咽困难、上肢肌无力、下肢肌无力、右眼睑下垂、左眼睑下垂”,聚三类核心症状群为“神疲乏力、吞咽困难、上肢肌无力、下肢肌无力、左眼睑下垂、右眼睑下垂”,聚四类核心症状群为“复视、眼球活动障碍、神疲乏力、上肢肌无力、下肢肌无力、左眼睑下垂、右眼睑下垂”。聚二、三、四类核心症状群中均含聚一类症状,但各自又有区别。
从链接图可以看出,聚四类分库中的核心药物群非常相近。
4.3中医文献分库
为了对比研究其它地区治疗重症肌无力的中医药治疗经验,在中国期刊全文数据库(CNKI)进行了重症肌无力相关文献的查询,去除重复发表、非核心期刊的文献,共检索出1985-2012年期间核心期刊发表的有关重症肌无力中医治疗文献176篇,进行数据统计和数据挖掘。
重症肌无力相关文献中使用的药物以补中益气汤、六味地黄汤加减为基本方,贯穿了补肾温阳、活血通络、化湿和营、益肾滋阴以及特色用药等治疗方法。其中核心药物群是“升麻、黄芪、甘草、党参、陈皮、柴胡、白术、当归”。
5.重症肌无力差异性表达基因miRNA的检测及验证
从现代医学还原论的视角来看,脏腑之“体”可以微观细化到基因表达方面,差异性表达基因miRNA的异常表达和调控与MG等自身免疫性疾病的发生发展密切相关。有关重症肌无力miRNA表达谱的文献数据非常有限。我们从MG总病例中严格筛选出符合纳入标准的病例作为研究对象,通过基因芯片检测技术并结合PCR方法,检测并验证重症肌无力患者中特异性表达的miRNA组合,初步探讨中医证型与miRNA表达谱的相关性,从实证的角度对MG存在先天体不足的形态学依据进行了论证。
[研究结论]
1.生理特点：脾胃为气机升降之枢轴,脾胃之气为五脏气化平衡的核心和动力。
2.病症规律：脾(胃)体不足、脾(胃)用不及、多脏受累、体用失调为主要病机；脾气不用、脾肾两虚兼湿邪中阻是基本矛盾,日久五脏不用、体用失调为病机转归。
3.用药特点：重症肌无力岭南用药特点以补益脾肾、升提中气、健脾化湿为主,地域特色用药突出,补阳不温燥,清热少苦寒；现代中医文献用药以补中益气为主,有补肾阳、益肾阴、化瘀血等不同治法。治疗用药上补用为主、补体助用、升降并用、体用同调。
4.实验研究：通过基因芯片结合PCR方法,对与重症肌无力发病密切相关的差异性表达基因miRNA进行了检测和验证,对反证先天体不足存在的形态学依据以及阐释中医药诊治重症肌无力的治疗靶点均有启示作用。
Myasthenia Gravis (MG) is an autoimmune disease, which acetylcholine receptor(AChR) antibody mediates, cell immunity depends on and addiment participates. It is presented clinically with being aggravating after activity and alleviative after the break.
There were not the records of myasthenia gravis in TCM documents. According to its primary symptom, myasthenia gravis is belonged to scope of flaccidity-syndrome in TCM usually. It has been found in ancient TCM literatures, treated as the several different terms.
The complexity of the pathogenesis and the diversity of clinical manifestations about the Flaccidity-syndrome in TCM had been discussed from various angles in ancient TCM literatures.
Theory of the Ontology and Function began with the theory of the philosophy category, combined with Chinese Medicine, which expounds pathogenesis and explores the clinical differentiation of Syndromes characters and the rules in drug usages from traditional Chinese medicine point of view.
Objective
Theory of the Ontology and Function of Viscera is adopted to discuss the characteristics and the rules in drug usages of Myasthenia Gravis by using the method of statistical analysis and date mining.
Methods
1. Collected886cases of patients according to diagnosis, inclusion and exclusion criteria of myasthenia gravis.
2. Designed clinical information collection questionnaire of myasthenia gravis, collected clinical information on patients with myasthenia gravis, filled out the questionnaire form.
3. established a database of myasthenia gravis disease, and preprocessed data.
4. Statistical analysis of Solar Terms, symptoms, frequently used traditional Chinese medicine and other variables by using various statistic methods with SPSS19.0and SAS8.0, combining the drug use in TCM literatures and the microarray results, the basic pathogenesis process and treatment regularity of the myasthenia gravis was explored by the TCM Ontology and Function theory of Viscera.
Results
1.theroy analysis
In brief, Ontology corresponds to body and Function is the same as action. Viscera distinguishes between Yin and Yang. Weakness of spleen and stomach is the main pathogenesis of Myasthenia Gravis. Based on it, Myasthenia gravis is usually recognized with ocular complaints or generalized muscle weakness, blepharoptosis may be an early and prominent sign of the disease. The viscera function will be in disorder, which appears on the imbalance of Yin and Yang over time.
2. general discussion
(1)Myasthenia Gravis incidence of women is higher than men, the middle-aged people and youth is morbility peak.
(2)This disease may have no apparent cause, cold for common factors.
(3)IIB type is the most common type in clinic.
(4)Myasthenia Gravis is often complicating with thymic abnormalities, and thyroid disease, pulmonary infection, rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus, and other autoimmune diseases.
(5) The time of onset of MG focuses primarily on the period from the beginning of Summer to the limit of heat as well as winter solstice.
3. Research on symptoms and medication regulation in overall database
(1)Common clinical symptoms of Myasthenia Gravis include:general fatigue, ptosis, accompanied by pale tongue with white greasy fur.
(2)Cumulative frequency statistics for the five organs of myasthenia gravis indicate the spleen is involved all along, followed by lung, kidney, liver, heart.
(3)Frequently traditional Chinese medicine include herbals of invigorating vital energy and spleen such as astragalus, licorice, wu zhao long, atractylodes, cimicifuga, bupleurum, tangerine peel, Chinese angelica, codonopsis, and herbals of invigorating kidney and warming yang such as cornus, eucommia, morinda officinal is, cistanche, polygonum mult iflorum, etc.The results indicate that morbility of myasthenia gravis is most closely with spleen and kidney.
(4)There is close relationship between drug combinations and symptoms group.
4. Research on symptoms and medication regulation in separate database
(1) Myasthenia Gravis is involved with spleen mainly, related with kidney, lungs closely, and also related with liver and heart secondly.
(2) The results of cluster analysis reflect the distribution of TCM syndromes of the viscera objectively.
(3) The principle of the drug use of TCM literature is given priority to the tonifying spleen and kidney.
5. The genes specifically expressed in MG are clear evidence of congenital deficiency about the Ontology.
Conclusion
1.The spleen and stomach is the central hub of the ascending and descending of functional activities of Qi, the soul and core of Vital energy of five-viscera.
2.Disorder in the Ontology and Function of spleen is the major pathogenesis of MG. As time goes on and several viscera diseases in succession or simultaneously.
3. The feature of clinical application for TCM is usually tonifying spleen and kidney based, meanwhile removing dampness to regulate spleen, balance the the Ontology and Function of Viscera
4. miRNAs are detected by Chip analysis and validated by PCR.
引文
[1]陈金亮，论中医痿病学说的形成及发展.[J].中国中医药信息杂志,1997;4(3):9.
[2]樊永平．痿证理论的源流梳理[J].北京中医药大学学报,2011;34(1):34.
[3]倪世秋．痿证古代文献综述[J]．医学信息.2008;21(3):431．
[4](隋)巢元方著，刘晓峰点校．诸病源候论[M]．北京：人民军医出版社，2006:56.
[5](宋)陈言著．三因极一病证方论[M]．北京：人民卫生出版社，1957:112.
[6](金)刘完素撰，孙洽熙，孙峰整理．素问玄机原病式[M]，北京：人民卫生出版社，2005:2.
[7](金)张子和撰，邓铁涛，赖畴整理．儒门事亲[M]．北京：人民卫生出版社，2005:12-13.
[8](金)李东垣撰．脾胃论[M]．北京：人民卫生出版社，2005:30-85.
[9](元)朱丹溪著，田思胜等主编．朱丹溪医学全书[M]．北京：中国中医药出版社，2006:281.
[10](元)朱丹溪著，田思胜等主编．朱丹溪医学全书[M]．北京：中国中医药出版社，2006:166.
[11](元)朱丹溪著，田思胜等主编．朱丹溪医学全书[M]．北京：中国中医药出版社，2006:35.
[12](明)王肯堂辑，倪和宪，彭怀仁点校．证治准绳·上册[M].北京：人民卫生出版社，2003:162.
[13](明)张介宾著，夏之秋，叶川，韦辉等校注．景岳全书[M].北京：中国中医药出版社，1994:382.
[14](清)李用粹编撰，竹剑平等整理．证治汇补[M].北京：人民卫生出版社，2006:328-329.
[15](清)叶天士原著，(清)华帕云编订，临证指南医案[M]．北京：华夏出版社，1995:389-393.
[16](清)张锡纯著，王云凯，李彬之，韩煌重校．医学衷中参西录[M]．石家庄：河北科学技术出版社，2002:202.
[17]邓铁涛．邓铁涛临床经验辑要[M]．北京：中国医药科技出版社，1998:17.
[18]郑开梅．孙慎初治疗重症肌无力的经验[J].上海中医药杂志,2005;39(7):19-20.
[19]李广文．辨治重症肌无力的探讨[J].光明中医，2003;18(3):2.
[20]李庚和．脾肾学说对重症肌无力症的探讨[J].新中医，1982;(4):8-12.
[21]董淑华．重症肌无力与祖国医学的脾肾学说[J].中医药学报，1995;(4):9-10.
[22]马耀茹．重症肌无力中医病机证治初探[J].陕西中医函授，1997;(4):14-15.
[23]刘少云．尚尔寿教授诊治重症肌无力经验摭拾[J].中医药学刊，2001;(19):306.
[24]周慎．重症肌无力从肝论治[J].中医杂志，1995;36(9):568.
[25]李寿山．重症肌无力从肝论治[J]．新中医，1985;(5):19.
[26]苏卫东．从肝论治重症肌无力的几点看法[J]．辽宁中医杂志，2005;32(10):1022-1023.
[27]陈贯一.重症肌无力371例治疗体会[J].浙江中医杂志，1988;(2):64.
[28]王长海．龙胆泻肝加减汤治眼睑下垂[J]．山西中医，1990;6(1):56.
[29]贺守愚．重症肌无力经验[J]．四川中医，1985;(4):53.
[30]陈金亮，许凤全．从奇经论治重症肌无力120例临床报告[J].光明中医，2000;(4):44-45.
[31]许凤全．吴以岭教授从奇经和络脉论治重症肌无力经验撷萃[J].四川中医，2006;24(2):4-6.
[32]邓中光，邱仕君．邓铁涛对重症肌无力的认识与辨证论治[J]．中国医药学报，1993;8(2): 11.
[33]刘会武，伊桐凝．张静生治疗重症肌无力经验介绍[J]．中国中医药信息杂志,2006;13(10):85-86
[34]陈爱华，王庆浩．重症肌无力中医药治疗近况[J].湖北中医杂志，1996;18(124):54-55.
[35]许凤全，陈金亮，胡军勇等．重肌灵系列制剂治疗重症肌无力300例[J].中国中医药科技，2001;8(5):333-335.
[36]刘少云．尚尔寿教授诊治重症肌无力经验披拾[J].中医药学刊，2001; (19):306.
[37]杨颖．中医对重症肌无力的理论认识及临床治疗[J].河北中医，2004;26(2):153-154.
[38]陈丽鸽．自拟强力水丸治疗重症肌无力101例[J].河南中医，2002;22(6):58.
[39]李玉杰．“益气活血柔肝汤”治疗重症肌无力[J].江苏中医药，2002;23(3):50.
[40]付玉如，付连超．起矮方治疗重症肌无力12例[J].山东中医杂志，1996;15(1):50
[41]陈贯一.重症肌无力症证治[J].中医杂志，1990;148(3):20.
[42]黄经纬．饶旺福．中医辨识治重症肌无力探微[J].辽宁中医杂志，2005;32(12):128.
[43]林成，邓琳．林楚．中西医结合治疗重症肌无力40例临床分析[J].现代医院，2006;6(7):88-89.
[44]陈惠英．对重症肌无力之本在脾肾之探析[J].实用中西医结合杂志，1998:11(9):845-84.
[45]常富业．痪病临床研究述评痪病临床研究述评[J]．现代中西医结合杂志，2008;17(23):3702-3706.
[46]凌静，任彬，王憬璐．黄茂的临床应用及展望[J].中医药信息，2003;20(3):9-12
[47]王维治，罗祖明等．神经病学[M].北京：人民卫生出版社，2002,第四版:283-285.
[48]朱殊．重症肌无力发病机制的研究进展[J]．江西医药，2011;(46)12: 1145-1146.
[49]Giraud M.Vandiedonek C.Garchon HJ. Genetic factors in autoimmune myasthenia gravis. Ann NY Acad Sei,2008: 11(32):180.
[50]Niks EH.Kuks JB.Versehuuren JJ. Epidemiology of myasthenia gravis with anti-muscle specific kinase antibodies in the Netherlands..1 Neurol Neurosurg Psychiatry,2007;78(4):17.
[51]RapoportB. Portolanos, McLachlanSM. etal.Combinational libraries:new insight into organ-specific auto antibodies. Immunol Today,1995; 16:43-49.
[52]李海明mRNA一种新的调控基因表达的小分子[J].RNA中国癌症杂志.2006;(16)8:675-676.
[53]Chen CZ.Li Lodish HF.etal.MicroRNAs modulate hematopoieticlineage differentiation [J].Science.2004:303:83-86.
[54]Wu L.Fan J.Belasco JG. MicroRNAs direct rapid deadenylation of mRNA [J].ProcNatlAcad SciUSA,2006; 103 (11): 4034-4039.
[55]Felli N.Fontana L.Pelosi E,etal.Micro-RNAs 221 and 222 inhibit normal erythropoieses and erythroleukemic cell growth via kit receptor down-modulation[J].Proc Natl Acad Sci USA,2005;102(50):18081-18086.
[56]Chen CZ.Li L,Lodish HF,etal.MicroRNAs modulate hematopoietic lineage differentiation[J]. Science,2004;303 (5654):83-86.
[57]Wu H,neilson JR.Kumar P.etal.miRNA profiling of native.effector and memory CD8 T cells[J].PLoS ONE,2009; (2): 1018-1020.
[58]Li QJ.Chau J.Ebert PJ.etal.miR-181a is an intrinsic modulator of T cell sensitivity and selection [J]. Cell,2009; 129(1): 147-161.
[59]Hung PS.Chen FC.Kuang SH,etal.miR-181 a induces differentiation of periodontal ligament cells[J].J Dent Res.2010; 89:252-257.
[60]KUNH R.LOHLER J,RKENNICK D,etal.Interleukin-10-deficient mice develop chronic enterocolitis[J]. Cell,1993;75 (2):263-274.
[61]ROERS A,SIEWE,STRITMATTER E.etal.T cell-specific in enhanced T cell responses but normal innate responses to lipopolysaccharide or skin irritation [J].J Exp Med,2004;200(10):1289-1297.
[62]Neilson JR.Zheng CX,Burge CB,etal.Dynamic regulation of miRNA expression in ordered stages of cellular develop-ment [J]. Genes Dev.2007;21(5):578-589.
[63]THAJ TH,CALADO DP,CASOLA S,etal.Regulation of the germinal center response by microRNA-155[J]. Science, 2007;316(5824):604-608.
[64]Stanczyk J,Pedrioli DM,Brentano F,etal.Altered expression of MicroRNA in synovial fibroblasts and synovial tissue in rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,2008;58:1001-1009.
[65]Nakasa T.Miyaki S.Okubo A,etal.Expression of microRNA-146 in rheumatoid arthritis synovial tissue[J].Arthritis Rheum,2008;58:1284-1292.
[66]Murata K,Yoshitomi H.Tanida S,etal.Plasma and synovial fluid microRNAs as potential biomarkers of rheumatoid arthritis osteoarthritis[J]. Arthritis Res Ther.2010:12(3):R86.
[67]Guo M,Mao X,Ji Q,etal.miR-146a in PBMCs modulates Thl function in patienta with acute coronary syndrome[J]. Immunol Cell Biol,2010;88(5):555-564.
[68]Dai Y,Huang YS.Tang M,etal.Microarray analysis of microRNA expression in peripheral blood cells of systemic lupus erythematosuspatients[J].Lupus,2007:16:939-946.
[69]Zhou H,Huang X,Cui H.etal.miR-155 and its star-form partnet miR-155 cooperatively regulate type linterferon production by human plasmacytoid dendritic cells[J].Blood,2010;116(26):5885-5894.
[70]王奇宇,王明蓉miRNA及其在医药领域应用的研究进展[J]中国抗生素杂志2011；36(3)：173-174.
[71]许贤豪.加强重症肌无力临床和基础的协作研究[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2000：7(4)：195-196.
[72]潘铁成,杨明山.胸腺疾病[M].北京：人民卫生出版社,2002,第一版：134-170.
[73]杨明山,方思羽,阮旭中.神经科急症诊断治疗学[M].武汉：湖北科学技术出版社,1995,第一版：403-416.
[74]许贤豪.神经免疫学[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学出版社,1992,第二版：113-149.
[75]MeriggioliMN, Rowin J, Richman JG, etal.Myeophenolate mofetil for myasthenia gravis:adoubleblind, placebo-controlled pilot study[J].AnnNY Acad Sci,2003;998:494-499.
[76]NaganeY, Utsugisawa K, ObaraD etal. Efficacy of low-dose FK506 in the treatment of Myasthenia gravis a randomized pilot study[J].EurNeurol,2005;53(3):146-150.
[77]王维治,罗祖明等.神经病学[M].北京：人民卫生出版社,2002,第四版：283-287.
[78]许志效.论藏象的体用关系[J].中国中医基础医学杂志2003;9(2)：3.
[79]马燕冬.“肝体阴用阳”说考辨[J].北京中医药大学学报,2006；29(3)：155-157.
[80]潘文奎.“体阴用阳”非独肝也[J].中医研究,1988；1(3)：16.
[81]张元贵.从“体阴用阳”谈脾之阴阳[J].中医药信息,2008,25(2)：8-9.
[82]王彦田.浅谈肝体阴用阳[J].河北中医,1992；14(6)：40.
[83]熊十力.体用论[M]北京：中华书局,1994：446.
[84]张岱年.中国哲学中的本体观念[J].安徽大学学报,1983；(3)：1.
[85]景海峰.中国哲学体用论的源与流[J].深圳大学学报(人文社会科学版),1991;8(1)：57.
[86]李从.浅谈从体用关系理解藏象概念[J].山东中医杂志,2006;(12)：848.
[87]力涛.宋代以前体用范畴的历史演变[J].学术论坛,1991;(3)：42-45.
[88]程颐.周易程氏传·序言[M].北京：中华书局,2010.
[89]李光宽.王夫之“体用不二”思想的方法论意义[J].江汉论坛,2004;6：59.
[90]清·赵学敏.本草纲止拾遗(影印版)[M].北京：人民卫生出版社,1957.183.
[91]刘劲松.高血压左室肥厚的中医病机学说[J].中国中医基础医学杂志.2004;10(2)：72-75.
[92]夏清华等.脏腑体用论初探[J].陕西中医2006;27(8)：975-977.
[93]刘可勤.“气”宇宙模式的文化要义与中医学[J].中国医药学报,1998;13(3)：7-8.
[94]窦志芳.基于“体用”之说构建中医肢体官窍体系的思考[J].世界中西医结合杂志,2009;4(1)：3-4.
[95]赵永厚.病中医理论创新思维.中华中医药学会全国第二次神志病学术年会稿件.
[96]王东方.立十纲理论,重临床实用—老中医干祖望教授学术思想研究[J].吉林中医药,2005;25(1)：10-11.
[97]金红姝.李德新治疗慢性肝炎经验[J].中医杂志,2001；42(11)：652-653.
[98]宋爱人,宋立人.中国百年百名中医临床家丛书—宋爱人[M].北京：中国中医药出版社,2002：130.
[99]邱仕君,陈坚雄,程宾.对中医五脏相关学说的理论探讨[J].湖北民族学院学报,2007；24(1)：1-3.
[100]邓铁涛,郑洪.中医五脏相关学说研究—从五行到五脏相关[J].中国工程科学.2008;10(2)：7-12.
[101]汪运富.从三焦、命门形质之争看脏腑研究[J].山东中医药大学学报,1998；22(4)：259-260.
[102]王肯堂.肯堂医论见：沈洪瑞主编.中国历代名医医话大观[M].太原：山西科学技术出版社,1996：87.
[103]张锡钝.医学衷中参西录[M].石家庄：河北人民出版社,1957：49.
[104]喻嘉言.喻嘉言医学三书[M].南昌：江西人民出版社,1984：389.
[105]王超基.于“大气论”的岭南重症肌无力病机阐述[J].中华中医药杂志2012；27(5)：1370-1372.
[106]王维治.神经病学[M].北京,人民卫生出版社,2001,第四版：283.
[107]国家中医药管理局.中华人民共和国中医药行业标准·中医病证诊断疗效标准[M].中国标准出版社,1994.
[108]姚乃礼著．中医症状鉴别诊断学[M]．北京：人民卫生出版社,2004, 3.
[109]朱文锋著，常见症状中医鉴别诊断学[M].北京：人民卫生出版社，2002, 1.
[110]邓铁涛著．实用中医诊断学[M]．北京：人民卫生出版社，2004, 11.
[111]邓铁涛著．中医诊断学[M].上海：上海科学技术出版社，1984.
[112]Hotelling H. Relations between two sets of variates[J] Biometrika 28.1936; 321-377.
[113]张明，朱会义，何书金．典型相关分析在土地利用结构研究中的应用[J].地理研究2001；20(6)：761-767.
[114]彭子益．圆运动的古中医学[M]．北京：中国中医药出版社，2009: 6.
[115]李建军．季节气候对人体生理病理影响的文献与实验研究[J].北京中医药大学博士论文，2005：6.
[116]陈良予．死亡与节之间的关系[J].浙江中医杂志，1999; 15(9): 409.
[177]叶天士.临证指南医案[M]．上海：上海科学技术出版社，1991:188.
[118]姜春华．辨证论治与辨证(病)施治[J]．辽宁中医杂志.1986; 8:38-39.
[119]朱文锋．症状诊疗的意义与内容[J].浙江中医学院学报,2000; 24(1):35-3.
[120]朱文锋．论症证病结合治疗[J]．辽宁中医杂志，2000; 27(1):6-8.
[121]张世平．邓铁涛教授治疗重症肌无力之经验总结[J].广州中医学院学报，1991; 8(23)：70-73.
[122]周仲瑛.健脾益肾、熄风通络法治疗重症肌无力[J].江苏中医药，2006: 27(12):40.
[123]王珏.裘昌林治疗痿证经验[J]．中医杂志，2010; 51(1):17.
[124]张燕平．李声岳治疗眼肌型重症肌无力经验[J].中医杂志,2006; 47(2):97
[125]丁元庆．风药治疗脑血管病回顾与分析[J]．时珍国医国药，1999: 10(11):868-869.
[126]罗再琼．试论风药活血[J].中国中医基础杂志，2001; 7(3): 57-58.
[127]刘金民．王永炎教授治疗痿证验案2则[J].北京中医药大学学报，1995; 18(2): 57.
[128]杨丁友．大剂量鸡血藤治疗重症肌无力[J]．中医杂志2003; 44(9):647.
[129]杨光宁．重用鸡血藤治疗重症肌无力[J].中医杂志2003;44(8): 573.
[2]樊永平．痿证理论的源流梳理[J].北京中医药大学学报,2011;34(1):34.
[3]倪世秋．痿证古代文献综述[J]．医学信息.2008;21(3):431．
[4](隋)巢元方著，刘晓峰点校．诸病源候论[M]．北京：人民军医出版社，2006:56.
[5](宋)陈言著．三因极一病证方论[M]．北京：人民卫生出版社，1957:112.
[6](金)刘完素撰，孙洽熙，孙峰整理．素问玄机原病式[M]，北京：人民卫生出版社，2005:2.
[7](金)张子和撰，邓铁涛，赖畴整理．儒门事亲[M]．北京：人民卫生出版社，2005:12-13.
[8](金)李东垣撰．脾胃论[M]．北京：人民卫生出版社，2005:30-85.
[9](元)朱丹溪著，田思胜等主编．朱丹溪医学全书[M]．北京：中国中医药出版社，2006:281.
[10](元)朱丹溪著，田思胜等主编．朱丹溪医学全书[M]．北京：中国中医药出版社，2006:166.
[11](元)朱丹溪著，田思胜等主编．朱丹溪医学全书[M]．北京：中国中医药出版社，2006:35.
[12](明)王肯堂辑，倪和宪，彭怀仁点校．证治准绳·上册[M].北京：人民卫生出版社，2003:162.
[13](明)张介宾著，夏之秋，叶川，韦辉等校注．景岳全书[M].北京：中国中医药出版社，1994:382.
[14](清)李用粹编撰，竹剑平等整理．证治汇补[M].北京：人民卫生出版社，2006:328-329.
[15](清)叶天士原著，(清)华帕云编订，临证指南医案[M]．北京：华夏出版社，1995:389-393.
[16](清)张锡纯著，王云凯，李彬之，韩煌重校．医学衷中参西录[M]．石家庄：河北科学技术出版社，2002:202.
[17]邓铁涛．邓铁涛临床经验辑要[M]．北京：中国医药科技出版社，1998:17.
[18]郑开梅．孙慎初治疗重症肌无力的经验[J].上海中医药杂志,2005;39(7):19-20.
[19]李广文．辨治重症肌无力的探讨[J].光明中医，2003;18(3):2.
[20]李庚和．脾肾学说对重症肌无力症的探讨[J].新中医，1982;(4):8-12.
[21]董淑华．重症肌无力与祖国医学的脾肾学说[J].中医药学报，1995;(4):9-10.
[22]马耀茹．重症肌无力中医病机证治初探[J].陕西中医函授，1997;(4):14-15.
[23]刘少云．尚尔寿教授诊治重症肌无力经验摭拾[J].中医药学刊，2001;(19):306.
[24]周慎．重症肌无力从肝论治[J].中医杂志，1995;36(9):568.
[25]李寿山．重症肌无力从肝论治[J]．新中医，1985;(5):19.
[26]苏卫东．从肝论治重症肌无力的几点看法[J]．辽宁中医杂志，2005;32(10):1022-1023.
[27]陈贯一.重症肌无力371例治疗体会[J].浙江中医杂志，1988;(2):64.
[28]王长海．龙胆泻肝加减汤治眼睑下垂[J]．山西中医，1990;6(1):56.
[29]贺守愚．重症肌无力经验[J]．四川中医，1985;(4):53.
[30]陈金亮，许凤全．从奇经论治重症肌无力120例临床报告[J].光明中医，2000;(4):44-45.
[31]许凤全．吴以岭教授从奇经和络脉论治重症肌无力经验撷萃[J].四川中医，2006;24(2):4-6.
[32]邓中光，邱仕君．邓铁涛对重症肌无力的认识与辨证论治[J]．中国医药学报，1993;8(2): 11.
[33]刘会武，伊桐凝．张静生治疗重症肌无力经验介绍[J]．中国中医药信息杂志,2006;13(10):85-86
[34]陈爱华，王庆浩．重症肌无力中医药治疗近况[J].湖北中医杂志，1996;18(124):54-55.
[35]许凤全，陈金亮，胡军勇等．重肌灵系列制剂治疗重症肌无力300例[J].中国中医药科技，2001;8(5):333-335.
[36]刘少云．尚尔寿教授诊治重症肌无力经验披拾[J].中医药学刊，2001; (19):306.
[37]杨颖．中医对重症肌无力的理论认识及临床治疗[J].河北中医，2004;26(2):153-154.
[38]陈丽鸽．自拟强力水丸治疗重症肌无力101例[J].河南中医，2002;22(6):58.
[39]李玉杰．“益气活血柔肝汤”治疗重症肌无力[J].江苏中医药，2002;23(3):50.
[40]付玉如，付连超．起矮方治疗重症肌无力12例[J].山东中医杂志，1996;15(1):50
[41]陈贯一.重症肌无力症证治[J].中医杂志，1990;148(3):20.
[42]黄经纬．饶旺福．中医辨识治重症肌无力探微[J].辽宁中医杂志，2005;32(12):128.
[43]林成，邓琳．林楚．中西医结合治疗重症肌无力40例临床分析[J].现代医院，2006;6(7):88-89.
[44]陈惠英．对重症肌无力之本在脾肾之探析[J].实用中西医结合杂志，1998:11(9):845-84.
[45]常富业．痪病临床研究述评痪病临床研究述评[J]．现代中西医结合杂志，2008;17(23):3702-3706.
[46]凌静，任彬，王憬璐．黄茂的临床应用及展望[J].中医药信息，2003;20(3):9-12
[47]王维治，罗祖明等．神经病学[M].北京：人民卫生出版社，2002,第四版:283-285.
[48]朱殊．重症肌无力发病机制的研究进展[J]．江西医药，2011;(46)12: 1145-1146.
[49]Giraud M.Vandiedonek C.Garchon HJ. Genetic factors in autoimmune myasthenia gravis. Ann NY Acad Sei,2008: 11(32):180.
[50]Niks EH.Kuks JB.Versehuuren JJ. Epidemiology of myasthenia gravis with anti-muscle specific kinase antibodies in the Netherlands..1 Neurol Neurosurg Psychiatry,2007;78(4):17.
[51]RapoportB. Portolanos, McLachlanSM. etal.Combinational libraries:new insight into organ-specific auto antibodies. Immunol Today,1995; 16:43-49.
[52]李海明mRNA一种新的调控基因表达的小分子[J].RNA中国癌症杂志.2006;(16)8:675-676.
[53]Chen CZ.Li Lodish HF.etal.MicroRNAs modulate hematopoieticlineage differentiation [J].Science.2004:303:83-86.
[54]Wu L.Fan J.Belasco JG. MicroRNAs direct rapid deadenylation of mRNA [J].ProcNatlAcad SciUSA,2006; 103 (11): 4034-4039.
[55]Felli N.Fontana L.Pelosi E,etal.Micro-RNAs 221 and 222 inhibit normal erythropoieses and erythroleukemic cell growth via kit receptor down-modulation[J].Proc Natl Acad Sci USA,2005;102(50):18081-18086.
[56]Chen CZ.Li L,Lodish HF,etal.MicroRNAs modulate hematopoietic lineage differentiation[J]. Science,2004;303 (5654):83-86.
[57]Wu H,neilson JR.Kumar P.etal.miRNA profiling of native.effector and memory CD8 T cells[J].PLoS ONE,2009; (2): 1018-1020.
[58]Li QJ.Chau J.Ebert PJ.etal.miR-181a is an intrinsic modulator of T cell sensitivity and selection [J]. Cell,2009; 129(1): 147-161.
[59]Hung PS.Chen FC.Kuang SH,etal.miR-181 a induces differentiation of periodontal ligament cells[J].J Dent Res.2010; 89:252-257.
[60]KUNH R.LOHLER J,RKENNICK D,etal.Interleukin-10-deficient mice develop chronic enterocolitis[J]. Cell,1993;75 (2):263-274.
[61]ROERS A,SIEWE,STRITMATTER E.etal.T cell-specific in enhanced T cell responses but normal innate responses to lipopolysaccharide or skin irritation [J].J Exp Med,2004;200(10):1289-1297.
[62]Neilson JR.Zheng CX,Burge CB,etal.Dynamic regulation of miRNA expression in ordered stages of cellular develop-ment [J]. Genes Dev.2007;21(5):578-589.
[63]THAJ TH,CALADO DP,CASOLA S,etal.Regulation of the germinal center response by microRNA-155[J]. Science, 2007;316(5824):604-608.
[64]Stanczyk J,Pedrioli DM,Brentano F,etal.Altered expression of MicroRNA in synovial fibroblasts and synovial tissue in rheumatoid arthritis[J].Arthritis Rheum,2008;58:1001-1009.
[65]Nakasa T.Miyaki S.Okubo A,etal.Expression of microRNA-146 in rheumatoid arthritis synovial tissue[J].Arthritis Rheum,2008;58:1284-1292.
[66]Murata K,Yoshitomi H.Tanida S,etal.Plasma and synovial fluid microRNAs as potential biomarkers of rheumatoid arthritis osteoarthritis[J]. Arthritis Res Ther.2010:12(3):R86.
[67]Guo M,Mao X,Ji Q,etal.miR-146a in PBMCs modulates Thl function in patienta with acute coronary syndrome[J]. Immunol Cell Biol,2010;88(5):555-564.
[68]Dai Y,Huang YS.Tang M,etal.Microarray analysis of microRNA expression in peripheral blood cells of systemic lupus erythematosuspatients[J].Lupus,2007:16:939-946.
[69]Zhou H,Huang X,Cui H.etal.miR-155 and its star-form partnet miR-155 cooperatively regulate type linterferon production by human plasmacytoid dendritic cells[J].Blood,2010;116(26):5885-5894.
[70]王奇宇,王明蓉miRNA及其在医药领域应用的研究进展[J]中国抗生素杂志2011；36(3)：173-174.
[71]许贤豪.加强重症肌无力临床和基础的协作研究[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2000：7(4)：195-196.
[72]潘铁成,杨明山.胸腺疾病[M].北京：人民卫生出版社,2002,第一版：134-170.
[73]杨明山,方思羽,阮旭中.神经科急症诊断治疗学[M].武汉：湖北科学技术出版社,1995,第一版：403-416.
[74]许贤豪.神经免疫学[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学出版社,1992,第二版：113-149.
[75]MeriggioliMN, Rowin J, Richman JG, etal.Myeophenolate mofetil for myasthenia gravis:adoubleblind, placebo-controlled pilot study[J].AnnNY Acad Sci,2003;998:494-499.
[76]NaganeY, Utsugisawa K, ObaraD etal. Efficacy of low-dose FK506 in the treatment of Myasthenia gravis a randomized pilot study[J].EurNeurol,2005;53(3):146-150.
[77]王维治,罗祖明等.神经病学[M].北京：人民卫生出版社,2002,第四版：283-287.
[78]许志效.论藏象的体用关系[J].中国中医基础医学杂志2003;9(2)：3.
[79]马燕冬.“肝体阴用阳”说考辨[J].北京中医药大学学报,2006；29(3)：155-157.
[80]潘文奎.“体阴用阳”非独肝也[J].中医研究,1988；1(3)：16.
[81]张元贵.从“体阴用阳”谈脾之阴阳[J].中医药信息,2008,25(2)：8-9.
[82]王彦田.浅谈肝体阴用阳[J].河北中医,1992；14(6)：40.
[83]熊十力.体用论[M]北京：中华书局,1994：446.
[84]张岱年.中国哲学中的本体观念[J].安徽大学学报,1983；(3)：1.
[85]景海峰.中国哲学体用论的源与流[J].深圳大学学报(人文社会科学版),1991;8(1)：57.
[86]李从.浅谈从体用关系理解藏象概念[J].山东中医杂志,2006;(12)：848.
[87]力涛.宋代以前体用范畴的历史演变[J].学术论坛,1991;(3)：42-45.
[88]程颐.周易程氏传·序言[M].北京：中华书局,2010.
[89]李光宽.王夫之“体用不二”思想的方法论意义[J].江汉论坛,2004;6：59.
[90]清·赵学敏.本草纲止拾遗(影印版)[M].北京：人民卫生出版社,1957.183.
[91]刘劲松.高血压左室肥厚的中医病机学说[J].中国中医基础医学杂志.2004;10(2)：72-75.
[92]夏清华等.脏腑体用论初探[J].陕西中医2006;27(8)：975-977.
[93]刘可勤.“气”宇宙模式的文化要义与中医学[J].中国医药学报,1998;13(3)：7-8.
[94]窦志芳.基于“体用”之说构建中医肢体官窍体系的思考[J].世界中西医结合杂志,2009;4(1)：3-4.
[95]赵永厚.病中医理论创新思维.中华中医药学会全国第二次神志病学术年会稿件.
[96]王东方.立十纲理论,重临床实用—老中医干祖望教授学术思想研究[J].吉林中医药,2005;25(1)：10-11.
[97]金红姝.李德新治疗慢性肝炎经验[J].中医杂志,2001；42(11)：652-653.
[98]宋爱人,宋立人.中国百年百名中医临床家丛书—宋爱人[M].北京：中国中医药出版社,2002：130.
[99]邱仕君,陈坚雄,程宾.对中医五脏相关学说的理论探讨[J].湖北民族学院学报,2007；24(1)：1-3.
[100]邓铁涛,郑洪.中医五脏相关学说研究—从五行到五脏相关[J].中国工程科学.2008;10(2)：7-12.
[101]汪运富.从三焦、命门形质之争看脏腑研究[J].山东中医药大学学报,1998；22(4)：259-260.
[102]王肯堂.肯堂医论见：沈洪瑞主编.中国历代名医医话大观[M].太原：山西科学技术出版社,1996：87.
[103]张锡钝.医学衷中参西录[M].石家庄：河北人民出版社,1957：49.
[104]喻嘉言.喻嘉言医学三书[M].南昌：江西人民出版社,1984：389.
[105]王超基.于“大气论”的岭南重症肌无力病机阐述[J].中华中医药杂志2012；27(5)：1370-1372.
[106]王维治.神经病学[M].北京,人民卫生出版社,2001,第四版：283.
[107]国家中医药管理局.中华人民共和国中医药行业标准·中医病证诊断疗效标准[M].中国标准出版社,1994.
[108]姚乃礼著．中医症状鉴别诊断学[M]．北京：人民卫生出版社,2004, 3.
[109]朱文锋著，常见症状中医鉴别诊断学[M].北京：人民卫生出版社，2002, 1.
[110]邓铁涛著．实用中医诊断学[M]．北京：人民卫生出版社，2004, 11.
[111]邓铁涛著．中医诊断学[M].上海：上海科学技术出版社，1984.
[112]Hotelling H. Relations between two sets of variates[J] Biometrika 28.1936; 321-377.
[113]张明，朱会义，何书金．典型相关分析在土地利用结构研究中的应用[J].地理研究2001；20(6)：761-767.
[114]彭子益．圆运动的古中医学[M]．北京：中国中医药出版社，2009: 6.
[115]李建军．季节气候对人体生理病理影响的文献与实验研究[J].北京中医药大学博士论文，2005：6.
[116]陈良予．死亡与节之间的关系[J].浙江中医杂志，1999; 15(9): 409.
[177]叶天士.临证指南医案[M]．上海：上海科学技术出版社，1991:188.
[118]姜春华．辨证论治与辨证(病)施治[J]．辽宁中医杂志.1986; 8:38-39.
[119]朱文锋．症状诊疗的意义与内容[J].浙江中医学院学报,2000; 24(1):35-3.
[120]朱文锋．论症证病结合治疗[J]．辽宁中医杂志，2000; 27(1):6-8.
[121]张世平．邓铁涛教授治疗重症肌无力之经验总结[J].广州中医学院学报，1991; 8(23)：70-73.
[122]周仲瑛.健脾益肾、熄风通络法治疗重症肌无力[J].江苏中医药，2006: 27(12):40.
[123]王珏.裘昌林治疗痿证经验[J]．中医杂志，2010; 51(1):17.
[124]张燕平．李声岳治疗眼肌型重症肌无力经验[J].中医杂志,2006; 47(2):97
[125]丁元庆．风药治疗脑血管病回顾与分析[J]．时珍国医国药，1999: 10(11):868-869.
[126]罗再琼．试论风药活血[J].中国中医基础杂志，2001; 7(3): 57-58.
[127]刘金民．王永炎教授治疗痿证验案2则[J].北京中医药大学学报，1995; 18(2): 57.
[128]杨丁友．大剂量鸡血藤治疗重症肌无力[J]．中医杂志2003; 44(9):647.
[129]杨光宁．重用鸡血藤治疗重症肌无力[J].中医杂志2003;44(8): 573.